[發明專利]一種以聚乙烯亞胺穩定的納米鉑粒子檢測葡萄糖的方法

有效

• 申請號: 201810057228.2
• 申請日: 2018-01-22
• 公開（公告）號: CN108375573B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 王龍剛;賴翔;趙禹;崔艷帥
• 申請（專利權）人: 燕山大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/33
• 代理公司: 秦皇島一誠知識產權事務所(普通合伙) 13116
• 代理人: 劉建年

1.一種以聚乙烯亞胺穩定的納米鉑粒子檢測葡萄糖的方法，其特征在于：

(1)聚乙烯亞胺PEI穩定的納米鉑粒子的制備：按1mL去離子水中加入0.5～1.0mg PEI，將PEI加入去離子水中，再加入1mol/L的鹽酸調至pH＝4,按PEI與四氯鉑酸鉀的摩爾比1：25～150的比例，將四氯鉑酸鉀加入PEI水溶液，然后在20℃，轉速500轉/分鐘的金屬浴中孵育15～25min；再按PEI與硼氫化鈉的摩爾比1：125～750的比例，將硼氫化鈉溶于0.3mol/L的氫氧化鈉水溶液中配成1mg/mL溶液，將硼氫化鈉溶液加入到上述孵育好的溶液中，在上述同樣的金屬浴條件下孵育10～15min；然后再按鹽酸與氫氧化鈉的摩爾比1：1的比例，將1mol/L的鹽酸加入到再次孵育好的溶液中，調節溶液的pH至中性，溶液變色，最后在金屬浴孵育2～3h，制得聚乙烯亞胺穩定的納米鉑粒子，即PEI-Pt_n，n代表平均每一個PEI分子中穩定的鉑原子數；

(2)葡萄糖檢測：按葡萄糖氧化酶與葡萄糖的摩爾比1：12～120的比例，將葡萄糖氧化酶(GOx)分別與濃度為0.1～1.0mmol/L葡萄糖溶液混合，在50℃下反應30min，反應產生過氧化氫(H₂O₂)；另取離心管，配置濃度為4～10μmol/L的PEI-Pt_n溶液和6mmol/L的3,3^’,5,5^’-四甲基聯苯胺(TMB)溶液，按PEI-Pt_n:TMB的摩爾比為1：450～180的比例，將PEI-Pt_n、TMB加入到400μL，0.2mol/L，pH＝4.0的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液，30℃下反應10min； 將上述的PEI-Pt_n、TMB和醋酸-醋酸鈉混合緩沖溶液作為顯色劑，分別加入到每個葡萄糖溶液中，30℃下反應20min，顯色產物溶液顏色為藍色，隨葡萄糖濃度增大顏色變深，用紫外可見分光光度計在652nm下測量吸光度，并以吸光度為縱坐標，葡萄糖的濃度作為橫坐標，繪制標準曲線并得出標準曲線方程，吸光度增大的程度與葡萄糖濃度在0.1～1.0mmol/L為線性關系。

2.根據權利要求1所述的以聚乙烯亞胺穩定的納米鉑粒子檢測葡萄糖的方法，其特征在于：所述聚乙烯亞胺的分子量為70000。