[發明專利]高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法

在審

• 申請號: 201810052257.X
• 申請日: 2018-01-18
• 公開（公告）號: CN108396018A
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發明（設計）人: 馮全忠;鄧玉林;孟薇薇;李月海;曲淑華;索文敏;戴榮繼;陳艷;孟世英;胡志成;孫俐麗
• 申請（專利權）人: 青海華杰實業有限公司;北京理工亙元科技有限公司
• 主分類號: C12N9/36
• 分類號: C12N9/36
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

1.一種高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(a)蛋清預處理：首先，分離蛋黃蛋清后將蛋清直接進行均質處理，隨后過濾去雜并將蛋清的pH調節至5～7，得到蛋清加工液；

(b)吸附與洗脫處理：在蛋清加工液中加入Na⁺弱酸性陽離子交換樹脂進行攪拌吸附2～4h，隨后用去離子水清洗樹脂，至洗出液的OD281值≤0.005，得到吸附后樹脂，然后用氯化鈉溶液對吸附后樹脂進行洗脫，收集洗脫液，得到洗脫后溶液；

(c)超濾濃縮：將洗脫后溶液進行濃縮超濾處理至原體積的0.08～0.15，得到超濾濃縮液，隨后對超濾濃縮液進行除鹽超濾處理，直至處理后的超濾透過液中氯離子濃度為0.001～0.003mol/L時結束超濾操作，并對超濾透過液進行干燥，得到蛋清溶菌酶。

2.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(a)均質處理的均質條件為200～400rpm，均質時間為20～30min。

3.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(b)Na⁺弱酸性陽離子交換樹脂由丙烯酸系弱酸性陽離子交換樹脂依次經過酸處理和堿處理轉換得到。

4.根據權利要求3所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述丙烯酸系弱酸性陽離子交換樹脂為D152。

5.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(b)中蛋清加工液與Na⁺弱酸性陽離子交換樹脂的比例為1：0.2～0.3；

優選的，所述步驟(b)中蛋清加工液與Na⁺弱酸性陽離子交換樹脂的比例為1：0.25。

6.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(b)氯化鈉溶液的濃度為1mol/L，加入的量與吸附后樹脂的體積相等；

優選的，所述氯化鈉溶液對吸附后樹脂的洗脫時間為0.5～1.5h。

7.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(c)超濾濃縮的超濾膜截留分子量為3000～5000Da，濃縮倍數為10～20倍。

8.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(c)除鹽超濾處理為，將超濾濃縮液加入同體積的水充分混合后進行超濾處理至超濾濃縮液原體積，隨后對超濾透過液中的氯離子濃度進行測定，當氯離子濃度不為0.001～0.003mol/L時，重復除鹽超濾處理步驟，直至處理后的超濾透過液中氯離子濃度為0.001～0.003mol/L時結束超濾操作。

9.根據權利要求1所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述步驟(c)干燥為噴霧干燥；

優選的，所述噴霧干燥的出風口溫度為75～80℃。

10.根據權利要求1～9任一項所述的高原特種養殖珍禽蛋蛋清溶菌酶的制備方法，其特征在于，所述高原特種養殖珍禽蛋為在高原地區散養并飼喂純天然植物飼料的中華黑白鳳烏骨雞、貴妃雞、珍珠雞、鵪鶉或大雁的蛋。