[發明專利]一種穩定表達VEGF120的間充質干細胞株及其體外應用在審
| 申請號: | 201810052195.2 | 申請日: | 2018-01-15 |
| 公開(公告)號: | CN108148865A | 公開(公告)日: | 2018-06-12 |
| 發明(設計)人: | 黃鳳杰;徐天蔚;劉俊俊;王旭昉;劉蘇子;高文遠 | 申請(專利權)人: | 中國藥科大學 |
| 主分類號: | C12N15/867 | 分類號: | C12N15/867;C12N5/10;C12N5/071 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 211198 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 糖尿病微血管病變 微血管內皮細胞 間充質干細胞 慢病毒感染 表達系統 生存能力 穩定表達 高表達 共轉染 慢病毒 微環境 細胞株 高脂 體外 外源 胰島 增殖 損傷 細胞 修復 收獲 治療 應用 | ||
1.高效穩定過表達血管內皮生長因子(VEGF120)的骨髓源間充質干細胞株(BM-MSCs)的構建方法,該方法通過PLVTH-pol-IRES-puro慢病毒過表達系統共轉染293T細胞收獲慢病毒,后用病毒感染BM-MSCs后獲得。
2.如權利要求1所述載體構建時將VEGF120基因整合到PLVTH載體時選取酶切位點為PmeI和Spe I,轉染時過表達載體質粒PLVTH質粒、包裝質粒p8.91、包膜質粒pMD2.G的最優比例為4∶3∶2。
3.棕櫚酸酯(PA)在造成胰島微血管內皮細胞(MS-1)有顯著性差異損傷的最佳濃度為200μmol/L。
4.如權利要求1或3所述干細胞上清液及過表達VEGF的干細胞上清液均對PA誘導的MS-1細胞增殖損傷有緩解作用,且過表達VEGF后效果更佳,但兩者均不呈現出劑量依賴關系。
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