[發明專利]一種中藥飲片卡那霉素抗體的配方及制備工藝在審
| 申請號: | 201810050175.1 | 申請日: | 2018-01-18 |
| 公開(公告)號: | CN108727501A | 公開(公告)日: | 2018-11-02 |
| 發明(設計)人: | 孟敏 | 申請(專利權)人: | 孟敏 |
| 主分類號: | C07K16/44 | 分類號: | C07K16/44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 抗體 硫酸卡那霉素 卡那霉素 制備工藝 中藥飲片 配方 弗氏不完全佐劑 十二烷基磺酸鈉 羊抗鼠酶標二抗 弗氏完全佐劑 磷酸鹽緩沖液 牛血清白蛋白 考馬斯亮藍 磷酸氫二鈉 卵清白蛋白 過氧化脲 競爭結合 酶標抗原 碳二亞胺 原料組成 重量份數 醋酸鈉 封閉液 牛血清 戊二醛 洗滌液 豬血清 乙醇 包被 偶聯 制備 甲醛 | ||
本發明公開了一種中藥飲片卡那霉素抗體的配方及制備工藝,按照重量份數由如下原料組成:硫酸卡那霉素58?80份、牛血清白蛋白5?25份、卵清白蛋白3?5份、弗氏完全佐劑3?5份、弗氏不完全佐劑3?5份、碳二亞胺3?5份、戊二醛1?2份、羊抗鼠酶標二抗1?3份、磷酸氫二鈉2?3份、醋酸鈉8?10份、十二烷基磺酸鈉15?20份、考馬斯亮藍R?250 10?15份、過氧化脲8?12份、乙醇6?11份、甲醛5?7份、磷酸鹽緩沖液5?7毫升、洗滌液PBST 0.5升、封閉液5%豬血清0.25升,以硫酸卡那霉素和牛血清白蛋為主要原料,采用偶聯方法制備出可以與酶標抗原競爭結合包被的抗體,整個反應過程具有簡單、高效、經濟、可操作性強等特點。
技術領域
本發明涉及卡那霉素抗體制備工藝領域,具體涉及一種中藥飲片卡那霉素抗體的配方及制備工藝。
背景技術
近年來,隨著抗生素等獸藥添加劑在農牧業領域里的應用不斷擴張,抗生素污染問題、獸藥殘留問題已日益嚴重??股氐全F藥半衰期長、自然條件下很難被分解,對環境危害巨大。如果不加控制的作為動物食品添加劑,抗生素在動物源性食品中會形成一定的殘留,如果人類長期服用此類含有抗生素殘留的食品,將對健康造成嚴重威脅。
細菌的耐藥性指的是細菌與某種藥物多次接觸后,對該藥物的敏感性下降甚至對其敏感性消失的現象。如果細菌長期接觸這些殘留的低濃度藥物,就會使其產生一定的耐藥性,而且細菌的耐藥性可以通過動物群中的細菌、人群中的細菌與生態系統中的細菌互相傳遞,可能會達到無法操控的規模。細菌耐藥性這一現象的危害不容忽視,它不僅能使得抗生素的療效在一定程度上減弱或失效;更嚴峻的是,由于其療效減弱,導致生產者增加投藥劑量,勢必造成藥物殘留量的增加,由此形成一個惡性循環,加重耐藥菌的普遍化。由此將導致嚴峻的人類環境問題及公共衛生問題。
氨基糖苷類抗生素能有效抑制細菌生長,它主要作用于細菌體內的核糖體30s亞基發生集聚反應,從而抑制細菌體內蛋白質的合成、阻礙已合成蛋白的釋放。具體過程為:氨基糖苷類抗生素通過細胞外膜的孔蛋白,然后經Ⅰ期轉運系統攝入細胞內,此過程為能量依賴過程,受鈣離子、鎂離子等離子及高滲、低氧和酸堿性等因素的影響,可被此類因素阻斷。當氨基糖苷類抗生素與細胞核糖體的30S亞基發生積聚時,可引起Ⅱ期轉運系統參與,此過程可導致大量氨基糖苷類抗生素在細胞內迅速積聚,阻斷正常的肽鏈延長過程,造成遺傳密碼mRNA的錯誤解讀,從而阻礙正常蛋白質的合成。這些非正常蛋白質進入細菌細胞膜,可引起細胞膜斷裂,致使胞內的核苷酸、鉀離子、腺嘌呤等參與生命活動的重要物質外漏,從而直接導致細菌死亡。氨基糖苷類抗生素對革蘭氏陰性細菌的抑制效果良好,但對革蘭氏陽性細菌的抑制效果較差。
發明內容
針對以上問題,本發明提供了一種中藥飲片卡那霉素抗體的配方及制備工藝,利用分子的官能團等功能基團,并添加一些偶聯試劑,產生一定的化學反應從而實現半抗原與載體分子偶聯,可以有效解決背景技術中的問題。
為了實現上述目的,本發明采用的技術方案如下:一種中藥飲片卡那霉素抗體的配方及制備工藝,按照重量份數由如下原料組成:
硫酸卡那霉素58-80份、牛血清白蛋白5-25份、卵清白蛋白3-5份、弗氏完全佐劑3-5份、弗氏不完全佐劑3-5份、碳二亞胺3-5份、戊二醛1-2份、羊抗鼠酶標二抗1-3份、磷酸氫二鈉2-3份、醋酸鈉8-10份、十二烷基磺酸鈉15-20份、考馬斯亮藍R-25010-15份、過氧化脲8-12份、乙醇6-11份、甲醛5-7份、硼氫化鈉8-13份、甲醇1-3份、濃硫酸1-3份、磷酸鹽緩沖液5-7毫升、包被用碳酸鹽緩沖液CBS 0.5升、洗滌液PBST 0.5升、封閉液5%豬血清0.25升,ELISA試驗顯色液0.5升、ELISA試驗終止液1升。
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