[發(fā)明專利]一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810046748.3
• 申請(qǐng)日: 2018-01-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108374030A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓鵬;蔣連祝;王哲奇;王琳;馬傳;梁小波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 昆明理工大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P19/04
• 分類(lèi)號(hào): C12P19/04;A01N43/16;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/77
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本發(fā)明公開(kāi)了一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將尖孢鐮刀菌進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng)，從發(fā)酵產(chǎn)物中分離出胞外水溶性粗多糖。本發(fā)明尖孢鐮刀菌菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)方法具有培養(yǎng)時(shí)間短的特點(diǎn)，本發(fā)明尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法簡(jiǎn)單易行，所得尖孢鐮刀菌胞外多糖具有抑菌效果較好、成本低的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

多糖廣泛的存在于動(dòng)植物體內(nèi)和微生物細(xì)胞壁中，是一種天然的高分子化合物，多糖不僅是構(gòu)成生物體重要的組成成分，同時(shí)也是維持生命體的生命活動(dòng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)的基本物質(zhì)之一。多糖具有多種生物活性，國(guó)內(nèi)外科研工作者的大量研究表明了多糖具有以下功能：抗腫瘤、抗病毒、抗炎癥、抗?jié)儭⒖咕茸饔?，其中很多真菌提取物及其多糖具有抑菌和免疫增?qiáng)作用。如香菇多糖被證實(shí)是一類(lèi)免疫激活劑，能激活巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,裂褶菌多糖具有明顯的細(xì)胞免疫促進(jìn)作用，假交替單胞菌的多糖對(duì)念珠菌較好抑制作用（HaoC, ZHENG Z, Peng C, et al. Inhibitory Effect of Extracellular PolysaccharideEPS-II from Pseudoalteromonas on Candida adhesion to Cornea in vitro.Biomedical and Environmental Sciences, 2012, 25(2): 210-215），灰樹(shù)花中提取的多糖有抑菌等多種生物活性作用（Su C H, Lai M N, Ng L T. Effects of differentextraction temperatures on the physicochemical properties of bioactivepolysaccharides from Grifola frondosa. Food chemistry, 2017, 220: 400-405）。尖孢鐮刀菌是一種代表性的根系真菌，也是一種廣泛存在的植物內(nèi)生真菌。目前人們對(duì)尖孢鐮刀菌的研究主要集中在其對(duì)植物致病機(jī)理、分子生物學(xué)和生物防治方面，最新研究表明:尖孢鐮刀菌多酚具有體外抗菌抗氧化活性（Dong J W, Cai L, Xiong J, et al.Improving the antioxidant and antibacterial activities of fermented Bletillastriata with Fusarium avenaceum and Fusarium oxysporum. Process Biochemistry,2015, 50(1): 8-13）。

目前尚未有相關(guān)尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法和抑菌活性的研究。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有尖孢鐮刀菌胞外多糖的技術(shù)問(wèn)題及不足，本發(fā)明提供一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應(yīng)用，本發(fā)明尖孢鐮刀菌菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)方法具有培養(yǎng)時(shí)間短，成本低的優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明制備的尖孢鐮刀菌胞外多糖抑菌效果較好。

一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，具體步驟如下：

（1）菌種活化：將尖孢鐮刀菌種接種到PDA培養(yǎng)基上，然后置于溫度為26~30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4~5 d；

（2）孢子懸液配置：在無(wú)菌條件下，采用吐溫80溶液將步驟（1）所得PDA培養(yǎng)基上的尖孢鐮刀菌的孢子洗下配制成孢子懸浮液；

（3）固體發(fā)酵培養(yǎng)：以麥麩為發(fā)酵固體基質(zhì)，以發(fā)酵培養(yǎng)基的質(zhì)量為100%計(jì)，添加蔗糖2~4%、蛋白胨1~ 2%、KH₂PO₄ 0.2~0.4%、水50~60%，滅菌處理，在發(fā)酵培養(yǎng)基上接種5~15%，步驟（2）所得孢子懸浮液，然后在溫度為26~30℃條件下恒溫發(fā)酵4~6 d；