[發明專利]一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201810046748.3
• 申請日: 2018-01-18
• 公開（公告）號: CN108374030A
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 韓鵬;蔣連祝;王哲奇;王琳;馬傳;梁小波
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;A01N43/16;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/77
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本發明公開了一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應用，屬于生物技術領域。本發明將尖孢鐮刀菌進行固體發酵培養，從發酵產物中分離出胞外水溶性粗多糖。本發明尖孢鐮刀菌菌的固體發酵培養方法具有培養時間短的特點，本發明尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法簡單易行，所得尖孢鐮刀菌胞外多糖具有抑菌效果較好、成本低的優點。

技術領域

本發明涉及一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應用，屬于生物技術領域。

背景技術

多糖廣泛的存在于動植物體內和微生物細胞壁中，是一種天然的高分子化合物，多糖不僅是構成生物體重要的組成成分，同時也是維持生命體的生命活動正常運轉的基本物質之一。多糖具有多種生物活性，國內外科研工作者的大量研究表明了多糖具有以下功能：抗腫瘤、抗病毒、抗炎癥、抗潰瘍、抗菌等作用，其中很多真菌提取物及其多糖具有抑菌和免疫增強作用。如香菇多糖被證實是一類免疫激活劑，能激活巨噬細胞和淋巴細胞,裂褶菌多糖具有明顯的細胞免疫促進作用，假交替單胞菌的多糖對念珠菌較好抑制作用（HaoC, ZHENG Z, Peng C, et al. Inhibitory Effect of Extracellular PolysaccharideEPS-II from Pseudoalteromonas on Candida adhesion to Cornea in vitro.Biomedical and Environmental Sciences, 2012, 25(2): 210-215），灰樹花中提取的多糖有抑菌等多種生物活性作用（Su C H, Lai M N, Ng L T. Effects of differentextraction temperatures on the physicochemical properties of bioactivepolysaccharides from Grifola frondosa. Food chemistry, 2017, 220: 400-405）。尖孢鐮刀菌是一種代表性的根系真菌，也是一種廣泛存在的植物內生真菌。目前人們對尖孢鐮刀菌的研究主要集中在其對植物致病機理、分子生物學和生物防治方面，最新研究表明:尖孢鐮刀菌多酚具有體外抗菌抗氧化活性（Dong J W, Cai L, Xiong J, et al.Improving the antioxidant and antibacterial activities of fermented Bletillastriata with Fusarium avenaceum and Fusarium oxysporum. Process Biochemistry,2015, 50(1): 8-13）。

目前尚未有相關尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法和抑菌活性的研究。

發明內容

針對現有尖孢鐮刀菌胞外多糖的技術問題及不足，本發明提供一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應用，本發明尖孢鐮刀菌菌的固體發酵培養方法具有培養時間短，成本低的優點，本發明制備的尖孢鐮刀菌胞外多糖抑菌效果較好。

一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，具體步驟如下：

（1）菌種活化：將尖孢鐮刀菌種接種到PDA培養基上，然后置于溫度為26~30℃恒溫培養箱中培養4~5 d；

（2）孢子懸液配置：在無菌條件下，采用吐溫80溶液將步驟（1）所得PDA培養基上的尖孢鐮刀菌的孢子洗下配制成孢子懸浮液；

（3）固體發酵培養：以麥麩為發酵固體基質，以發酵培養基的質量為100%計，添加蔗糖2~4%、蛋白胨1~ 2%、KH₂PO₄ 0.2~0.4%、水50~60%，滅菌處理，在發酵培養基上接種5~15%，步驟（2）所得孢子懸浮液，然后在溫度為26~30℃條件下恒溫發酵4~6 d；