[發明專利]一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法及應用在審
| 申請號： | 201810046748.3 | 申請日： | 2018-01-18 |
| 公開（公告）號： | CN108374030A | 公開（公告）日： | 2018-08-07 |
| 發明（設計）人： | 韓鵬;蔣連祝;王哲奇;王琳;馬傳;梁小波 | 申請（專利權）人： | 昆明理工大學 |
| 主分類號： | C12P19/04 | 分類號： | C12P19/04;A01N43/16;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/77 |
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| 地址： | 650093 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 尖孢鐮刀菌 胞外多糖 制備 固體發酵培養 生物技術領域 水溶性粗多糖 發酵產物 抑菌 應用 | ||
1.一種尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：
（1）菌種活化：將尖孢鐮刀菌種接種到PDA培養基上，然后置于溫度為28~30℃恒溫培養箱中培養4~5 d；
（2）孢子懸液配置：在無菌條件下，采用吐溫80溶液將步驟（1）所得PDA培養基上的尖孢鐮刀菌的孢子洗下配制成孢子懸浮液；
（3）固體發酵培養：以麥麩為發酵固體基質，以發酵培養基的質量為100%計，添加蔗糖2~4%、蛋白胨1~2 %、KH2PO4 0.2~0.4%、水50~60%，滅菌處理，在發酵培養基上接種5~15 %，步驟（2）所得孢子懸浮液，然后在溫度為26~30℃條件下恒溫發酵4~6 d；
（4）分離：在步驟（3）所得固態發酵產物中加入蒸餾水，倒碎，在溫度為90~100℃條件下熱水浸提20~40 min，過濾、在溫度為4℃條件下離心取上清液；
（5）胞外多糖制備：將步驟（4）所得上清液加入到無水乙醇中混合均勻得到混合液A，在溫度為4℃條件下離心取沉淀，再用無水乙醇洗滌沉淀3次，然后烘干至恒重即得粗多糖，粗多糖用去離子水溶解，然后再進行去離子水透析16~24 h即得胞外多糖產品。
2.根據權利要求1所述尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，其特征在于：步驟（2）吐溫80水溶液質量百分數濃度為0.1 %，孢子懸浮液濃度為1×107個/mL。
3.根據權利要求1所述尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，其特征在于：步驟（3）的麥麩過20目篩。
4.根據權利要求1所述尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，其特征在于：步驟（5）混合液A中上清液的體積百分數為5~15 %。
5.根據權利要求1所述尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，其特征在于：步驟（5）中烘干溫度為40~50℃。
6.根據權利要求1所述尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法，其特征在于：步驟（5）中去離子水透析的截留分子量為8~12 kDa透析袋上的截留分子量范圍，去離子水透析過程中每8h換一次去離子水。
7.權利要求1~6所述尖孢鐮刀菌胞外多糖的制備方法所制備的尖孢鐮刀菌胞外多糖應用于抑菌。
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