[發(fā)明專利]一種副溶血弧菌噬菌體微生態(tài)制劑及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810042463.2
• 申請日: 2018-01-17
• 公開（公告）號: CN108018262A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜宗然;付漢清;郭立
• 申請（專利權(quán)）人: 廈門昶科生物工程有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12Q1/04;C12R1/92
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 劉奇

1.一種副溶血弧菌噬菌體微生態(tài)制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將副溶血弧菌液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到宿主發(fā)酵液；副溶血弧菌宿主在發(fā)酵培養(yǎng)基中的初始菌體濃度為1010～1016CFU/ml；

2)將濃度為108～1016PFU/ml的副溶血弧菌噬菌體液接種至所述宿主發(fā)酵液中發(fā)酵培養(yǎng)；副溶血弧菌噬菌體液的接種量為1％～10％；

3)所述步驟2)中發(fā)酵培養(yǎng)進(jìn)行至6～12h時(shí)，向得到的宿主發(fā)酵液中流加副溶血弧菌液，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)，控制整個(gè)發(fā)酵周期為18～24h，得到發(fā)酵液；

4)將所述步驟3)中得到的發(fā)酵液進(jìn)行滅活副溶血弧菌宿主，得到副溶血弧菌噬菌體微生態(tài)制劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中副溶血弧菌液的流加體積為宿主發(fā)酵液體積的1％～10％；副溶血弧菌液的濃度為1010～1014PFU/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中每小時(shí)流加副溶血弧菌液的體積為宿主發(fā)酵液體積的0.5％～5％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中副溶血弧菌液的流加時(shí)間為2～4h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中發(fā)酵培養(yǎng)基包括以下含量組分：蛋白胨1～20g/L、牛肉浸粉1～20g/L和氯化鈉1～20g/L；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值為7.0～9.0。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)和步驟3)中的發(fā)酵培養(yǎng)條件獨(dú)立如下：發(fā)酵溫度為28～35℃，宿主發(fā)酵液的pH值維持6～9；發(fā)酵在攪拌條件下進(jìn)行，攪拌轉(zhuǎn)速為50～200rpm。

7.根據(jù)權(quán)利要求1～3、5和6任意一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟4)中滅活的方法為水浴；水浴的溫度為45～65℃；水浴的時(shí)間為2～5h。

8.權(quán)利要求1～7任意一項(xiàng)所述方法制備的副溶血弧菌噬菌體的微生物制劑，其特征在于，副溶血弧菌噬菌體的效價(jià)為1012～1016PFU/ml。

9.權(quán)利要求8所述的副溶血弧菌噬菌體的微生物制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中鑒定或檢測副溶血弧菌中的應(yīng)用。