[發(fā)明專利]結(jié)核分枝桿菌變態(tài)反應原組合物及其制備方法與應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810036527.8 | 申請日: | 2018-01-15 |
| 公開(公告)號: | CN108276494B | 公開(公告)日: | 2019-09-24 |
| 發(fā)明(設計)人: | 高正倫;崔穎杰;王化楠;田家倫 | 申請(專利權(quán))人: | 北京祥瑞生物制品有限公司 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;G01N33/68;G01N33/569;C12N15/62;C12N15/70;C12N15/74 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黃爽 |
| 地址: | 101407 北京市懷*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 結(jié)核分枝桿菌 變態(tài)反應原 等量混合 融合蛋白 制備 結(jié)核分枝桿菌抗原 原核表達系統(tǒng) 結(jié)核病感染 基因序列 設計合成 重組蛋白 蛋白質(zhì) 應用 串聯(lián) 蛋白 轉(zhuǎn)入 診斷 | ||
1.結(jié)核分枝桿菌變態(tài)反應原組合物,其特征在于,所述組合物由CFP10融合蛋白和Esat-6重組蛋白按等重量比或等摩爾比混合而成;
所述Esat-6重組蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述CFP10融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.權(quán)利要求1所述組合物在制備結(jié)核診斷試劑或檢測試劑盒中的應用。
3.一種結(jié)核診斷試劑,其特征在于,所述診斷試劑中含有權(quán)利要求1所述組合物。
4.權(quán)利要求1所述組合物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)構(gòu)建編碼所述CFP10融合蛋白的基因表達盒;
2)構(gòu)建編碼所述Esat-6重組蛋白的基因表達盒;
3)將步驟1)和步驟2)的表達盒構(gòu)建到同一表達載體上,利用原核表達系統(tǒng)表達目的蛋白;或者,
將步驟1)和步驟2)的表達盒分別構(gòu)建到不同表達載體上,利用原核表達系統(tǒng)表達目的蛋白;
4)分離純化步驟3)表達的目的蛋白,將CFP10融合蛋白和Esat-6重組蛋白按等重量比或等摩爾比混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,編碼所述CFP10融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;
編碼所述Esat-6重組蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述表達載體為pET-9d,所述原核表達系統(tǒng)為大腸桿菌或乳酸菌。
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