[發明專利]用陽離子脂質體包裹負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒的制備方法

在審

• 申請號: 201810032266.2
• 申請日: 2018-01-12
• 公開（公告）號: CN108562737A
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發明（設計）人: 常津;潘惠卓;王漢杰;諶紅彬;王天歌;張超楠;王鎬鋒;郝亞鋒
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 王麗

1.用陽離子脂質體包裹負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒的制備方法；其特征是包括如下步驟：

(1)將鈣黃綠素負載到介孔二氧化硅納米顆粒中；

(2)制備粒徑均一的陽離子脂質體；

(3)將陽離子脂質體包裹到負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒外。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是步驟(1)制備方法是：將鈣黃綠素與介孔二氧化硅納米顆粒溶液混合均勻，避光磁力攪拌6～12小時，離心收集，沉淀用雙蒸水重懸，得到負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒。

3.如權利要求2所述的方法，其特征是用去離子水將鈣黃綠素配置成濃度250～300微摩爾的溶液，加入質量比1:10～5介孔二氧化硅納米顆粒，混合均勻。

4.如權利要求2所述的方法，其特征是避光磁力攪拌速度是300～400轉/分鐘磁力攪拌6～12小時，10000～15000轉/分鐘離心10～15分鐘，離心收集，沉淀用雙蒸水重懸定量至1～5毫克每毫升，得到負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒。

5.如權利要求1所述的方法，其特征是步驟(2)制備方法是：稱取(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺并加入三氯甲烷溶解；去除溶劑后，向反應器中加入質量分數50％的磷酸鹽緩沖液，超聲30～40分鐘，得到云霧狀白色液體，為懸浮在磷酸鹽緩沖液中的粒徑不等的陽離子脂質體；將以上溶液用孔徑100納米的濾膜過濾，得到的澄清穩定液體即為粒徑均一的陽離子脂質體。

6.如權利要求5所述的方法，其特征是稱取(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺加入三氯甲烷配制成濃度為2～10毫克每毫升的溶液溶解；將旋轉蒸發儀的水浴鍋溫度設置至36～42℃，打開真空泵抽真空30～40分鐘后，在反應器形成一層乳白色覆蓋物，再加入質量分數50％的磷酸鹽緩沖液體。

7.如權利要求5所述的方法，其特征是得到云霧狀白色液體用孔徑為孔徑100納米的濾膜在15000～20000轉/分鐘下離心20～40分鐘，重復5～10次，得到的澄清穩定液體即為粒徑均一的陽離子脂質體。

8.如權利要求1所述的方法，其特征是步驟(3)制備方法是：將粒徑均一的陽離子脂質體及負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒按照體積比1:2～4的比例混合，超聲3～5分鐘后，離心去上清，沉淀用等體積磷酸鹽溶液重懸，得到陽離子脂質體包裹負載鈣黃綠素的可對活細胞進行標記的介孔二氧化硅納米顆粒。

9.如權利要求8所述的方法，其特征是超聲后15000～20000轉/分鐘離心5～10分鐘去上清，重復1～2遍，沉淀用等體積磷酸鹽溶液重懸。

10.如權利要求1方法制備的陽離子脂質體包裹負載鈣黃綠素的介孔二氧化硅納米顆粒，粒徑在80～130納米。