[發明專利]測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法

在審

• 申請號: 201810030850.4
• 申請日: 2018-01-12
• 公開（公告）號: CN108362691A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: 鄭甲成;劉婷;李杰勤;石松;王麗華;詹秋文;劉言龍
• 申請（專利權）人: 安徽科技學院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 合肥律通專利代理事務所(普通合伙) 34140
• 代理人: 鄭松林

本發明提供一種測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法，步驟包括：試劑的配置；樣品測定；利用比色法測定化合物的吸光值判斷甜高粱莖桿的含糖量。苯酚硫酸法測定可溶性總糖方法簡單，試劑便宜，所用實驗儀器較少，靈敏度較高，實驗過程中基本不受蛋白質存在的影響，并且產生的顏色可穩定3h左右，便于試驗操作。

技術領域

本發明涉及甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量檢測技術領域，尤其涉及一種測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法。

背景技術

甜高粱的用途十分廣泛，它不僅產糧食，也產糖、糖漿，還可以做酒、酒精和味精，纖維還可以造紙，甜高粱作為飼用及糖料作物被長期栽種。甜高粱收獲期貯存量大，很難在短時間內全部加工，而鮮樣不便于存放，很容易造成甜高粱的損失。因此，將甜高粱莖桿鮮樣烘干后則可以長時間存放。可是樣品烘干后，莖桿內部的糖分含量有何變化，很有必要建立一種穩定可靠的甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的測定方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法，以解決上述技術問題。

本發明為解決上述技術問題，采用以下技術方案來實現：

一種測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

一、試劑的配置

A、9g/ml苯酚溶液：將苯酚晶體，密度1.017g/ml，于60℃水浴鍋溶解，取88.496ml苯酚液體加入含有10ml蒸餾水的容量瓶中；

B、10mg/ml蔗糖標準液：稱取蔗糖1g，于100ml容量瓶內，加5ml蒸餾水預溶后，緩慢加入0.25ml濃硫酸，立即充分搖勻，室溫放置30s，繼續緩慢加入0.25ml濃硫酸，立即充分搖勻，室溫放置1min，用蒸餾水定容100ml；

C、100μg/ml蔗糖溶液：吸取10mg/ml的蔗糖標準液1ml，定容至100ml；

二、樣品測定

A、標準曲線制作：

A1底物反應液準備：準備20ml刻度試管7支，依次編號：0-7，其中0號為對照管)，1-6號為樣品管，按下表配置測試樣，總體積2ml：

A2反應液配置：依次在7支試管加入9g/ml苯酚溶液1ml，充分混勻后，分別向7支試管依次迅速加入5ml濃硫酸，時間間隔10s以內；

A3樣品測定：反應液室溫下放置30min，485nm波長下測定吸光度，繪制標準曲線，求出標準直線方程；

B、甜高粱莖桿干樣可溶性糖測定

B1樣品處理

取甜高粱一個莖桿，烘干至恒重；利用植物樣品粉碎機將莖桿干樣粉碎，50目過篩后裝于塑料袋中備用；

B2可溶性總糖的提取

稱取甜高粱莖桿粉末3份，分別置于三支刻度試管中，0.3g/份，三支刻度試管中分別加入8ml蒸餾水，軟木塞封口，于沸水中煮30min提取總糖，濾紙過濾提取液至25ml容量瓶中，繼續漂洗試管2-3次，定容，備用；

B3測定

①吸取以上提取液0.5ml至3個刻度試管中，分別加蒸餾水1.5ml后；

②迅速加入9g/ml的苯酚溶液1ml，立即搖晃混勻，置于試管架上20s；

③緩慢加入5ml濃硫酸，立即輕微搖晃混勻，防止液體飛濺；

④4℃冰箱內放置10mim，顯色，

⑤485nm波長，測定吸光度，根據標準曲線，求得含糖量；