[發明專利]測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法

在審

• 申請號: 201810030850.4
• 申請日: 2018-01-12
• 公開（公告）號: CN108362691A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: 鄭甲成;劉婷;李杰勤;石松;王麗華;詹秋文;劉言龍
• 申請（專利權）人: 安徽科技學院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 合肥律通專利代理事務所(普通合伙) 34140
• 代理人: 鄭松林

1.一種測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

一、試劑的配置

A、9g/ml苯酚溶液：將苯酚晶體，密度1.017g/ml，于60℃水浴鍋溶解，取88.496ml苯酚液體加入含有10ml蒸餾水的容量瓶中；

B、10mg/ml蔗糖標準液：稱取蔗糖1g，于100ml容量瓶內，加5ml蒸餾水預溶后，緩慢加入0.25ml濃硫酸，立即充分搖勻，室溫放置30s，繼續緩慢加入0.25ml濃硫酸，立即充分搖勻，室溫放置1min，用蒸餾水定容100ml；

C、100μg/ml蔗糖溶液：吸取10mg/ml的蔗糖標準液1ml，定容至100ml；

二、樣品測定

A、標準曲線制作：

A1底物反應液準備：準備20ml刻度試管7支，依次編號：0-7，其中0號為對照管)，1-6號為樣品管，按下表配置測試樣，總體積2ml：

A2反應液配置：依次在7支試管加入9g/ml苯酚溶液1ml，充分混勻后，分別向7支試管依次迅速加入5ml濃硫酸，時間間隔10s以內；

A3樣品測定：反應液室溫下放置30min，485nm波長下測定吸光度，繪制標準曲線，求出標準直線方程；

B、甜高粱莖桿干樣可溶性糖測定

B1樣品處理

取甜高粱一個莖桿，烘干至恒重；利用植物樣品粉碎機將莖桿干樣粉碎，50目過篩后裝于塑料袋中備用；

B2可溶性總糖的提取

稱取甜高粱莖桿粉末3份，分別置于三支刻度試管中，0.3g/份，三支刻度試管中分別加入8ml蒸餾水，軟木塞封口，于沸水中煮30min提取總糖，濾紙過濾提取液至25ml容量瓶中，繼續漂洗試管2-3次，定容，備用；

B3測定

①吸取以上提取液0.5ml至3個刻度試管中，分別加蒸餾水1.5ml后；

②迅速加入9g/ml的苯酚溶液1ml，立即搖晃混勻，置于試管架上20s；

③緩慢加入5ml濃硫酸，立即輕微搖晃混勻，防止液體飛濺；

④4℃冰箱內放置10mim，顯色，

⑤485nm波長，測定吸光度，根據標準曲線，求得含糖量；

三、結果計算

按下式計算樣品的糖含量

式中，m：從標準曲線查得的糖含量，單位μg；Vt為提取液體積，單位ml；Vs為測定時取用的樣品體積，單位ml；N為稀釋倍數；m₀為樣品質量。

2.根據權利要求1所述的測定甜高粱莖桿干樣可溶性糖含量的方法，其特征在于：步驟二的B2小步中，在加熱過程中要保證試管浸在沸水中，試管不能貼近燒杯壁，確保受熱均勻，并且各試管加熱的時間要保持一致。