[發(fā)明專(zhuān)利]一種基于基因重組發(fā)光菌的工業(yè)廢水生物毒性檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810023633.2
• 申請(qǐng)日: 2018-01-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108226493A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 應(yīng)光國(guó);趙建亮;劉有勝;黃國(guó)勇;張芊芊;蔣宇霞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院廣州地球化學(xué)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/569
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/569;G01N33/535;G01N21/76;G01N21/64
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗

1.一種基于基因重組發(fā)光菌的工業(yè)廢水生物毒性檢測(cè)方法，其特征在于包括以下步驟：

第一步，制備發(fā)光菌的菌懸液：取凍存菌種，解凍后離心，去掉上清液后進(jìn)行培養(yǎng)，第一次復(fù)蘇液重新接種到新培養(yǎng)液，再次培養(yǎng)至一定OD值，離心后棄去上清液，制成菌懸液備用；

第二步，樣品梯度稀釋?zhuān)合葘⒐I(yè)廢水從原液按10倍稀釋比例依次稀釋?zhuān)醪綑z測(cè)毒性后，確定最佳稀釋范圍，然后從最佳稀釋范圍的上限依次按2倍梯度進(jìn)行樣品稀釋?zhuān)?/p>

第三步，樣品綜合毒性測(cè)定：轉(zhuǎn)移稀釋后的樣品至酶標(biāo)板，空白對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照同時(shí)進(jìn)行，加入菌懸液后通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定生物發(fā)光強(qiáng)度；

所述的發(fā)光菌為Escherichia coli HB101 pUCD607。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于基因重組發(fā)光菌的工業(yè)廢水生物毒性檢測(cè)方法，其特征在于：

第一步中所述的OD值為OD₅₅₀＝0.6～1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于基因重組發(fā)光菌的工業(yè)廢水生物毒性檢測(cè)方法，其特征在于：

第三步中所述的酶標(biāo)板為96孔酶標(biāo)板。