[發明專利]一種用于治療女性特有腫瘤的含有男性染色體干細胞的制劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201810022288.0
• 申請日: 2018-01-10
• 公開（公告）號: CN108030789A
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發明（設計）人: 周萱
• 申請（專利權）人: 奧思達干細胞有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61P35/00;C12N5/0775
• 代理公司: 無錫華源專利商標事務所(普通合伙) 32228
• 代理人: 聶啟新

1.一種用于治療女性特有腫瘤的含有男性染色體干細胞的制劑，其特征在于所述制劑包括含有男性XY染色體的胚胎源骨髓間充質干細胞、外周血血漿蛋白和生理鹽水。

2.根據權利要求1所述的含有男性染色體干細胞的制劑，其特征在于所述制劑中，含有男性XY染色體的胚胎源骨髓間充質干細胞的濃度為(1-3)×107個/mL，外周血血漿蛋白的用量為80～160ng/mL，余量為生理鹽水，配成1mL制劑。

3.根據權利要求1所述的含有男性染色體干細胞的制劑，其特征在于所述含有男性XY染色體的胚胎源骨髓間充質干細胞的制備方法為：

(1)將檢測合格的男性胚胎骨髓間充質干細胞放置在含血清的DMEM/F12培養基的培養瓶中培養，將培養瓶置于溫度為37℃、飽和濕度、5％的CO2濃度的培養箱內開始培養，每2～3天更換一次培養液，去除未貼壁的細胞；

(2)培養3天時，細胞長滿后用0.05％胰酶消化后離心收集細胞；

(3)將步驟(2)收集的細胞重復上述步驟繼續傳代培養，待細胞達到90％以上密度，進行消化、傳代，收集第3～5代細胞凍存、復蘇備用；

(4)采用流式細胞儀篩選出標記和粘附分子高表達CD105、CD73、CD44，不表達或低表達CD34和CD45的細胞；再做染色體核型分析，即獲得所述含有男性XY染色體的胚胎源骨髓間充質干細胞。

4.根據權利要求3所述的含有男性染色體干細胞的制劑，其特征在于步驟(1)中所述DMEM/F12培養基中含有20mM/L HEPES、0.1％大豆胰酶抑制劑、25～50μg/mL轉鐵蛋白、10～20μg/mL纖粘連蛋白和20～60ng/mL的成纖維細胞生長因子-4。

5.根據權利要求3所述的含有男性染色體干細胞的制劑，其特征在于步驟(1)中所述DMEM/F12培養基中血清的含量為10～15％。

6.根據權利要求1所述的含有男性染色體干細胞的制劑，其特征在于所述含有男性XY染色體的胚胎源骨髓間充質干細胞可以替換為含有男性染色體的其他人源干細胞。