[發明專利]一種從川楝子中制備Gli基因抑制劑大戟烷型三萜的方法

在審

• 申請號: 201810013902.7
• 申請日: 2018-01-08
• 公開（公告）號: CN108191946A
• 公開（公告）日: 2018-06-22
• 發明（設計）人: 陳世偉;賴旭宇
• 申請（專利權）人: 陳世偉
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 趙超;張立榮

本發明公開了一種從川楝子中制備Gli基因抑制劑大戟烷型三萜的方法，包括：步驟S1，溶劑提取：川楝子用50?95％乙醇提取，過濾、濃縮；步驟S2，樹脂富集：濃縮液上樣于AB?8大孔樹脂，先用30％乙醇洗脫10?14個柱體積，再用65％乙醇洗脫，收集第7?9個柱體積洗脫液，濃縮至干；步驟S3，分子垂釣：將步驟S2所得富集產物用垂釣試劑提取，提取液過濾后用二氯甲烷提取，靜置、沉淀，收集上清液，濃縮至干；其中，所述垂釣試劑為氯化膽堿與氯化鋅按照摩爾比1:3形成的低共熔溶劑；步驟S4，高速逆流：以體積比為4:6:3:7的石油醚?乙酸乙酯?甲醇?水作為溶劑系統，根據色譜圖收集對應洗脫峰。本發明提供的方法制備的Meliasenin B、C和D純度高，適于工業生產。

技術領域

本發明屬于化學領域，涉及天然產物的制備方法，具體涉及一種從川楝子中制備Gli基因抑制劑Meliasenin B、C和D的方法。

背景技術

Meliasenin B、C和D是從川楝子中分離得到的三種大戟烷型三萜(參考文獻：LimonoidsandTriterpenoids from the StemBark ofMeliatoosendan,J.Nat.Prod.2010,73,664-668)。

目前，沒有關于Meliasenin B、C和D的藥理活性和醫藥用途報道。但是，卻有研究表明川楝子中包括但不局限于Meliasenin B在內的化合物與川楝子的肝毒性相關(參考文獻：川楝子中肝毒性成分的快速篩查研究，中國中藥雜志，2013年6月第38卷第11期)。

項目組在篩選治療肝癌的化合物時發現，Meliasenin B、C和D具有抗肝癌的活性，明確了其分子機制，研究了這三種化合物對正常肝細胞的毒性，并提供了減毒方法(已申請專利)。

但是，傳統的分離制備Meliasenin B、C和D單體的方法需要反復使用硅膠柱層析，而反復硅膠柱層析是很難工業化應用的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從川楝子中制備Gli基因抑制劑Meliasenin B、C和D的方法。

本發明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現的：

一種從川楝子中制備Meliasenin B、C和D的方法，包括如下步驟：

步驟S1，溶劑提取：將川楝子粉碎，50-95％乙醇提取，提取液過濾、濃縮至無醇味；

步驟S2，樹脂富集：將步驟S1所得濃縮液上樣于AB-8大孔吸附樹脂，先用30％乙醇洗脫10-14個柱體積，再用65％乙醇洗脫，收集第7-9個柱體積洗脫液，濃縮至干；

步驟S3，分子垂釣：將步驟S2所得富集產物用垂釣試劑提取，提取液過濾后用3-5倍體積的二氯甲烷提取，靜置、沉淀，收集上清液，濃縮至干；其中，所述垂釣試劑為氯化膽堿與氯化鋅按照摩爾比1:3形成的低共熔溶劑；

步驟S4，高速逆流：將步驟S3所得濃縮物用高速逆流色譜分離，以體積比為4:6:3:7的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水作為溶劑系統，上相作為固定相，下相作為流動相，根據色譜圖收集Meliasenin B、C和D對應的洗脫峰。

優選地，步驟S1提取溶劑為70％乙醇。

優選地，步驟S1提取的料液比為1:30。

優選地，步驟S2先用30％乙醇洗脫12個柱體積。

優選地，步驟S3富集產物提取時的料液比為1:5。

優選地，步驟S3過濾后用4倍體積二氯甲烷提取。

優選地，步驟S4流動相流速為2mL/min，檢測波長225nm，分離溫度25℃，轉速850r/min。