[發明專利]自身免疫性肝炎的診斷試劑盒及相關基因在制備該試劑盒中的應用

有效

• 申請號: 201810010859.9
• 申請日: 2018-01-05
• 公開（公告）號: CN108220421B
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 李璇
• 申請（專利權）人: 智海基因科技南京有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6869;C12N15/11
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548
• 代理人: 李靜

本發明提供了一種用于診斷自身免疫性肝炎(AIH)的基因標志物及其試劑盒，利用所述基因標志物可以快速、有效的診斷自身免疫性肝炎(AIH)。

技術領域

本發明屬于疾病研究領域，具體涉及自身免疫性肝炎(AIH)的診斷標志物及其試劑盒的開發。

背景技術

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)是一種由異常自身免疫反應介導的慢性炎癥性肝臟疾病，以血清自身抗體陽性、轉氨酶水平和免疫球蛋白G水平升高、組織學上表現為界面性肝炎為臨床特點。一般而言，AIH患者對免疫抑制劑應答良好，然而如不治療可進展為肝硬化、肝功能衰竭。目前，尚缺乏我國AIH流行病學確切的資料。近年來，隨著對AIH診斷和認識水平的不斷提高，我國AIH患者檢出率逐年升高。AIH已成為非病毒性肝病的重要組成部分，日益受到人們的關注。

AIH的病因和發病機制尚未完全闡明，并發癥和伴發病多，尚無特效治療，病程經過呈慢性、波動性。前瞻性研究顯示，未經治療的嚴重AIH患者在診斷后半年內的死亡率高達40％，幸存者中有40％發展為肝硬化，54％的患者在肝硬化2年內出現食管靜脈曲張，最終有20％的患者死于食管靜脈曲張破裂引起的大出血。因此及時診斷，并給予合理恰當的治療，對于延緩或逆轉此病有非常重要的意義。AIH 的診斷有一定難度，需要有特征性表現的存在，易導致漏診或誤診；同時需要排除其他的情況，特別是病毒性肝炎。而診斷為病毒性肝炎的也不乏其人，特別是急性起病時，更易誤診隨著丙型病毒性肝炎的被證實，增加了AIH診斷的不確定性。丙肝患者常常表現出與AIH相似的特征。

近年來，隨著分子生物學技術的迅速發展，從遺傳易感性的角度來闡述AIH的發病機制逐漸成為研究的熱點。人類白細胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)是已知的最重要的AIH遺傳風險因子。 HLA區域和AIH的相關性在不同地區和人群中被廣泛研究，是目前證據最確鑿的易感基因。

我國AIH遺傳學研究尚處于起步階段，與西方國家研究水平存在較大差距。在中國人群中開展全基因組、大樣本、反復驗證的遺傳學研究具有重要意義，不但有助于發現新的、中國人群特異的AIH易感基因，還可為進一步揭示疾病的發病機制和個性化診療提供依據。我們利用高通量轉錄組測序篩選與AIH密切相關的基因，不僅有利于研究AIH的發生和發展的病理機制，而且能為診斷和治療AIH提供新的診斷標志物或新的藥物靶點。

發明內容

為了彌補現有技術中自身免疫性肝炎(AIH)缺乏特異性的臨床表現及生化指標、在臨床工作中診斷存在一定困難的缺陷，本發明提供一種可用于AIH疾病診療的標志物基因。相比傳統的AIH疾病的診斷和治療方法，使用基因標志物來診斷和治療AIH疾病具有及時性、特異性和無創性。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

提供一種診斷自身免疫性肝炎(AIH)的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含通過檢測受試者外周血中KCNIP2基因、C16orf54基因和IL21基因的表達水平來判斷受試者是否患有自身免疫性肝炎的試劑。

優選的，所述試劑包括用RT-PCR、實時定量PCR或基因芯片診斷自身免疫性肝炎的試劑。

所述用于RT-PCR或實時定量PCR的試劑為如下引物：

KCNIP2：正向引物為5’-GACAGTTCGCTCCCTTCAG-3’(SEQ ID NO：1)；

反向引物為5’-CCCCGAAGAATCACGGACA-3’(SEQ ID NO：2)；

C16orf54：正向引物為5’-CCAGAGCCACAAATCCTGT-3’(SEQ ID NO：5)；

反向引物為5’-TAGGACAACGCTCCTCTCCA-3’(SEQ ID NO：6)；