[發明專利]甾體藥物中間體的制備方法

有效

• 申請號: 201810007701.6
• 申請日: 2018-01-04
• 公開（公告）號: CN108559766B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 王敬華;劉喜榮;孟浩;陳宏
• 申請（專利權）人: 湖南新合新生物醫藥有限公司
• 主分類號: C12P33/02
• 分類號: C12P33/02;C12P33/00;C07J7/00;C12R1/365
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 黃曉慶

1.一種甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：用簡單諾卡氏菌對第一化合物進行微生物轉化得到所述甾體藥物中間體，所述第一化合物如通式所示，所述甾體藥物中間體如通式所示，

通式和通式中R為H或甲基；

所述微生物轉化具體包括以下步驟：

將簡單諾卡氏菌接種于發酵培養基中；

在所述發酵培養基中加入所述第一化合物，經發酵得到發酵液；

將所述發酵液分離提取即得所述甾體藥物中間體；

其中，在所述發酵前還包括以下步驟：在所述發酵培養基中加入聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚，所述聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚與所述發酵培養基的質量體積比為0.01g~0.2g:100mL；

所述第一化合物與所述發酵培養基的質量體積比為1g~8g:100mL；

所述發酵時的溫度為26℃~32℃，攪拌轉速為120rpm~200rpm，空氣流量為0.3vvm~0.7vvm，罐壓為0.02MPa~0.06MPa；

每100mL所述發酵培養基中包含以下質量的組分：葡萄糖0.2g~2.0g、玉米漿0.5g~1.5g、蛋白胨0.3g~1.0g、磷酸二氫鉀0.1g~0.3g和消泡劑0.01g~0.2g。

2.根據權利要求1所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，所述第一化合物為4,9(11)-孕甾-16α-甲基-17-羥基-3,20-二酮-21-醋酸酯。

3.根據權利要求2所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，所述發酵培養基的pH值為6.5~7.5。

4.根據權利要求1所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，所述第一化合物的粒徑大小為100~300目。

5.根據權利要求1~4任一項所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，所述發酵時的溫度為31±1℃，攪拌轉速為180rpm。

6.根據權利要求1~4任一項所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，發酵時間為72小時。

7.根據權利要求1~4任一項所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，所述第一化合物為1,4,9(11)-孕甾-17-羥基-3,20-二酮-21-醋酸酯。

8.根據權利要求1~4任一項所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，在將簡單諾卡氏菌接種于所述發酵培養基之前還包括以下步驟：將簡單諾卡氏菌進行斜面培養和種子培養。

9.根據權利要求1~4任一項所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，所述分離提取包括以下步驟：將所述發酵液過濾得到濾餅，干燥后用二氯甲烷溶解，然后過濾得到濾液，于35~50℃減壓濃縮干燥。

10.根據權利要求9所述的甾體藥物中間體的制備方法，其特征在于，在所述減壓濃縮干燥后還包括以下步驟：將所述減壓濃縮干燥得到的固體溶于甲醇與二氯甲烷的混合溶劑中，于40~45℃回流1~3小時，然后降溫至10~30℃，過濾得到濾餅，烘干即得所述甾體藥物中間體。