[發明專利]分離的呈味肽及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810007698.8
• 申請日: 2018-01-04
• 公開（公告）號: CN108059651B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 黃嘉成;謝俊杰;朱新燕;李棟林;陸永國;王智榮
• 申請（專利權）人: 東莞東陽光保健品研發有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C12N15/31;C12P21/06;A23L33/18;A23L31/00;A23L2/56;A23L27/20
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

1.由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列組成的多肽或由SEQ ID NO:2~9所示核苷酸序列組成的核酸在制備食品中的用途，其特征在于，所述多肽用于呈味，所述核酸編碼所述多肽。

2.根據權利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽來源于蛹蟲草。

3.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，制備所述多肽的方法包括：

（1）原料預處理：蛹蟲草于45~55℃烘干，經中藥粉碎機粉碎，過60~100目篩；10~20g蛹蟲草粉和100~200g純化水混合均勻，煮制15~30min后，冷卻至30~40℃；

（2）酶解：調節pH至6.0~7.0，按蛹蟲草粉質量的0.5~2%加入風味蛋白酶和中性蛋白酶，在45~55℃下攪拌酶解4~6h；酶解完成后，于85~95℃水浴中滅酶10~30min；4000~6000×g離心10~20min，取上清液，得到蛹蟲草酶解液；

（3）超濾分離：用截留分子量為5000 Da的超濾膜對蛹蟲草酶解液進行分離，收集透過液，減壓濃縮，凍干，得到組分P0；

（4）柱層析分離：組分P0復溶于純化水中，使其濃度為5~15mg/mL；以純化水為洗脫液，利用Sephadex G-15對其進行柱層析分離；收集各組分，減壓濃縮，凍干，得到組分P1~P8；作感官評價，篩選出呈味閾值為0.02%~0.025%，呈味特性為鮮甜味的P3；

（5）反相高效液相色譜純化：將組分P3配制成濃度為1~5mg/mL的溶液；采用資生堂CAPCELL PAK ADME色譜柱，用20mmol/L乙酸銨/乙腈進行洗脫，檢測波長為214nm，收集組分P3-1~P3-4，減壓濃縮，凍干；作感官評價，篩選出呈味閾值為0.029%~0.033%，呈味特性為鮮甜味的P3-3；

（6）氨基酸序列分析：利用電噴霧四極桿飛行時間質譜對P3-3的氨基酸序列進行分析。

4.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述食品包括選自調味品、休閑食品、飲料的至少之一。