[發(fā)明專利]豬圓環(huán)病毒3型全基因組擴(kuò)增方法及其PCR引物在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810006490.4 | 申請(qǐng)日: | 2018-02-22 |
| 公開(公告)號(hào): | CN110184282A | 公開(公告)日: | 2019-08-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 付朋飛;張學(xué)賢;馬良;趙亞榮 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究中心;福州大北農(nóng)生物技術(shù)有限公司;北京科牧豐生物制藥有限公司;北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12N15/34 | 分類號(hào): | C12N15/34;C12N15/11;C12Q1/70 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100098 北京市海淀區(qū)杏石*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 豬圓環(huán)病毒 擴(kuò)增 全基因組序列 引物 全基因組 特異性檢測引物 流行病學(xué)調(diào)查 目的片段 遺傳進(jìn)化 作用位置 對(duì)引物 病毒 修正 補(bǔ)充 分析 | ||
1.一種豬圓環(huán)病毒3型全基因組,其序列如Seq ID No.1所示。
2.一對(duì)用于擴(kuò)增豬圓環(huán)病毒3型全基因組的引物,其為:
P1:5-ACCCAGGACAAAGCCTCTTC-3(Seq ID No.2);
P2:5-GGGTGAGCGCTGGTAGTTCC-3(Seq ID No.3)。
3.一對(duì)修正引物,用所述引物的擴(kuò)增片段對(duì)權(quán)利要求2所述的P1、P2引物作用位置進(jìn)行修正,其序列為:
P3:5-ATAAGATACTAAAGATGAAAGTTACAC-3(Seq IDNo.4);
P4:5-TTAGAGAACGGACTTGTAACG-3(Seq ID No.5)。
4.一種測定豬圓環(huán)病毒3型全基因組序列的方法,其特征在于,包括如下步驟:
1)提取攜帶豬圓環(huán)病毒3型的豬病料DNA;
2)用權(quán)利要求2所述引物對(duì)提取的病料DNA進(jìn)行豬圓環(huán)病毒3型全基因組PCR擴(kuò)增,用權(quán)利要求3所述引物對(duì)提取的病料DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增;
3)對(duì)權(quán)利要求2所述引物擴(kuò)增的片段和權(quán)利要求3所述引物擴(kuò)增的片段分別進(jìn)行測序;
4)利用序列分析軟件對(duì)P1/P2引物擴(kuò)增的全基因序列進(jìn)行分析,結(jié)合P3/P4引物擴(kuò)增得到的修正序列對(duì)P1/P2引物作用位置進(jìn)行修正,得到豬圓環(huán)病毒3型全基因組序列。
5.一種體外檢測豬圓環(huán)病毒3型的方法,其包括如下步驟:
1)提取待檢病料DNA;
2)用權(quán)利要求2所述引物對(duì)提取的病料DNA進(jìn)行豬圓環(huán)病毒3型全基因組PCR擴(kuò)增;
3)對(duì)擴(kuò)增的片段進(jìn)行測序,得到豬圓環(huán)病毒3型全基因組序列。
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