[發(fā)明專利]一種檢測CAR-T細(xì)胞數(shù)的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810001908.2
• 申請日: 2018-01-02
• 公開（公告）號: CN108107204B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 賴沛龍;陳曉梅;翁建宇;杜欣
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省人民醫(yī)院(廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院)
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;G01N33/566
• 代理公司: 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44100
• 代理人: 劉菁菁

1.一種檢測CAR-T細(xì)胞數(shù)的方法，其特征在于：在CAR-T分子胞內(nèi)引入C5aR胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，檢測C5aR的表達(dá)率從而獲得CAR-T細(xì)胞數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：構(gòu)建一種嵌合抗原受體，其包含能夠結(jié)合抗原的胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和至少一個胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，所述至少一個胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域是指C5aR胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，或與C5aR胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域串聯(lián)的信號傳遞區(qū)域的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：與C5aR胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域串聯(lián)的信號傳遞區(qū)域的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域選自CD3ζ、CD28、4-1BB中的一種或多種。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域還包括CD3ζ胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，所述C5aR胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域配置在CD3ζ胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的C末端側(cè)。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域?yàn)樽訬末端側(cè)開始依次連接的4-1BB胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、CD3ζ胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域和C5aR胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述C5aR含有如序列表1所示的核苷酸序列。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：通過破膜劑將CAR-T細(xì)胞破膜，通過流式方法檢測T細(xì)胞內(nèi)C5aR表達(dá)率，即為CAR-T細(xì)胞數(shù)。