[發明專利]轉基因動物和生物生產方法

在審

• 申請號: 201780081794.0
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN110177878A
• 公開（公告）日: 2019-08-27
• 發明（設計）人: R·雁如·蔡;徐捷;陳育慶;張繼峰;孔令潔
• 申請（專利權）人: 應用干細胞有限公司;密歇根大學董事會
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C07K14/00;C12N15/85
• 代理公司: 北京市君合律師事務所 11517
• 代理人: 張怡;杜丹

1.一種遺傳修飾的非人哺乳動物，其包含插入泌乳蛋白基因的內源基因座處的錨定DNA序列，其中所述錨定序列包含第一位點特異性重組酶識別位點。

2.根據權利要求1所述的非人哺乳動物，其中所述泌乳蛋白基因選自由以下組成的組：αS1-酪蛋白(CSN1)、αS2-酪蛋白、β-酪蛋白(CSN2)、κ-酪蛋白、乳清酸基因和α-乳清蛋白。

3.根據權利要求1所述的非人哺乳動物，其中所述泌乳蛋白基因是β-酪蛋白。

4.根據權利要求3所述的非人哺乳動物，其中所述錨定DNA序列插入所述β-酪蛋白內源基因座的內含子1中。

5.根據權利要求1所述的非人哺乳動物，其中所述第一位點特異性重組酶識別位點被位點特異性重組酶識別，所述位點特異性重組酶選自由以下組成的組：Cre、Flp、λ整合酶、γ-δ解離酶、Tn3解離酶的、Sin解離酶、Gin轉化酶、Hin轉化酶、Tn5044解離酶、IS607轉座酶、Bxb1、wBeta、BL3、phiR4、A118、TG1、MR11、phi370、SPBc、TP901-1、phiRV、FC1、K38、phiBT1和phiC31。

6.根據權利要求1所述的非人哺乳動物，其中所述錨定DNA序列還包含報告基因，所述報告基因與所述泌乳蛋白基因的內源啟動子可操作地連接。

7.根據權利要求6所述的非人哺乳動物，其中所述錨定DNA序列還包含第二位點特異性重組酶識別位點，其中所述報告基因側接所述第一位點特異性重組酶識別位點和所述第二位點特異性重組酶識別位點。

8.根據權利要求7所述的非人哺乳動物，其中所述第一位點特異性重組酶識別位點為phiC31-attP，且所述第二位點特異性重組酶識別位點為Bxb1-attP，或反之亦然。

9.根據前述權利要求中任一項所述的非人哺乳動物，其中所述非人哺乳動物為嚙齒動物或兔形目動物。

10.根據權利要求9所述的非人哺乳動物，其中所述兔形目動物是兔。

11.一種遺傳修飾的非人哺乳動物，其包含插入到泌乳蛋白基因的內源基因座處的轉基因，其中所述轉基因編碼分泌性蛋白并且與所述泌乳蛋白基因的內源啟動子可操作地連接，并且其中所述轉基因側接第一位點特異性重組酶重組后位點和第二位點特異性重組酶重組后位點。

12.根據權利要求11所述的非人哺乳動物，其中所述第一位點特異性重組酶重組后位點為attR。

13.根據權利要求11所述的非人哺乳動物，其中所述第二位點特異性重組酶重組后位點為attL。

14.根據權利要求11所述的非人哺乳動物，其中所述轉基因在其5'末端包含信號肽編碼序列。

15.根據權利要求11所述的非人哺乳動物，其中所述轉基因在其3'末端包含polyA序列。

16.根據權利要求11所述的非人哺乳動物，其中所述轉基因編碼治療性蛋白，所述治療性蛋白選自由以下組成的組：抗原結合蛋白、抗體、疫苗、融合蛋白、酶、輔酶、凝血因子和溶酶體蛋白。

17.根據權利要求11所述的非人哺乳動物，其中所述轉基因是人FVII或LL37。