[發明專利]治療性的活性復合物

在審

• 申請號: 201780079284.X
• 申請日: 2017-12-19
• 公開（公告）號: CN110234321A
• 公開（公告）日: 2019-09-13
• 發明（設計）人: 凱瑟琳娜·斯萬堡;阿夫塔卜·納迪姆;肯尼思·洪·莫卡;何俊勛
• 申請（專利權）人: 哈姆雷特藥品AB
• 主分類號: A61K31/201
• 分類號: A61K31/201;A61K38/17;A61P35/00;C07K14/00
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦

本發明提供了一種生物活性復合物，該復合物包含長度最多為50個氨基酸的肽與油酸或其鹽，所述肽包含具有膜干擾活性的蛋白質的α?螺旋結構域或其變體，所述變體缺乏半胱氨酸殘基，前提是所述蛋白質不是α?乳清蛋白。這種類型的復合物可用于治療，特別是癌癥的治療。

技術領域

本發明涉及一類具有治療活性的肽，特別是作為抗癌或抗腫瘤制劑的肽。制備這些肽的方法以及含有它們的藥物組合物構成了本發明的另一方面。

背景技術

理想情況下，新型癌癥治療應將療效與對靶向腫瘤的選擇性結合起來，并且新的靶向療法可以更精確地起作用。然而，組織毒性和副作用仍然是常態，并且新的腫瘤特異性細胞死亡機制的概念受到了合理的懷疑。然而，最近對某些蛋白質-脂質復合物的腫瘤殺傷作用的研究表明，腫瘤細胞可能具有保守的細胞死亡機制，使其區別于正常的分化細胞。這些蛋白質-脂質復合物插入脂質雙層，通過擾亂腫瘤細胞的膜結構從而引發細胞死亡。隨后的關鍵細胞功能的內化和抑制將腫瘤細胞與健康的分化細胞區分開來，因此，腫瘤細胞被殺死，而正常的分化細胞存活。

這些特性使蛋白質-脂質復合物成為引人關注的候選藥物，其具有廣泛的腫瘤殺傷活性和明確的腫瘤特異性。在部分人乳中偶然被發現的HAMLET(對腫瘤細胞致命的人類α-乳清蛋白)說明了這種方法的可行性。HAMLET以快速的動力學殺死許多不同的腫瘤細胞，并在結腸癌、膠質母細胞瘤和膀胱癌的動物模型中顯示出治療功效。研究者驅動的臨床試驗表明，HAMLET對皮膚乳頭狀瘤具有局部活性，并誘導膀胱癌患者死亡的腫瘤細胞脫落到尿液中。

α-乳清蛋白是人乳中最豐富的蛋白質，由于作為乳糖合成酶復合物的特異性底物，其對哺乳期哺乳動物的存活至關重要。HAMLET通過球狀α-乳清蛋白的部分去折疊和去質子化的油酸的結合形成，二者的化學計量比為1/4-8。

還有許多衍生自α-乳清蛋白的肽被發現其本身具有治療效果(參見例如WO2012/069836)。

發明內容

申請人已經鑒定出特異性α-乳清蛋白肽結構域作為腫瘤細胞識別和死亡的功能性配體。來自不同組織的腫瘤細胞之間共有的肽反應性表明，油酸存在時α-螺旋肽被腫瘤細胞膜識別，并且這種相互作用在體內的癌細胞和已形成的癌癥中觸發保守的死亡反應。因此，如針對已知的基于α-乳清蛋白的α-螺旋結構域的復合物所做的工作示例的，包含這些肽的復合物顯示出廣泛的腫瘤殺傷活性。然而，申請人驚奇地發現這些效應可以推廣到具有膜干擾活性的其他α-結構域肽。

這項工作確定了一種新的、通用的機制，通過該機制，α-螺旋肽可以靶向并殺死腫瘤細胞。申請人發現膜相互作用的肽結構域形成了具有廣泛腫瘤殺傷活性的油酸復合物。這一概念的例子是α-乳清蛋白的N-末端α螺旋，其侵入腫瘤細胞并積聚在核散斑體中，在那里其通過對散斑體成分SC-35、PKC和Pol II的直接作用來抑制轉錄。這種“功能的獲得(gain-of function)”是針對一系列α肽而重現的，這些α肽具有廣泛的序列，包括COPII家族中的Sar1，其中當其與油酸鹽混合時，α-螺旋的膜整合肽獲得腫瘤殺傷活性。相反，這些蛋白質的β折疊結構域被分選到溶酶體中以進行降解。合成的α-1肽形成治療性油酸鹽復合物，其降低了鼠膀胱癌模型中的腫瘤負荷。這些發現表明，在油酸存在時腫瘤細胞識別α-螺旋肽基序，并通過激活腫瘤細胞死亡的保守機制來應對。

如本發明所述，其提供了一種生物活性復合物，所述復合物包含長度最多為50個氨基酸的肽與油酸或其鹽，所述肽包含具有膜干擾活性的蛋白質的α-螺旋結構域或其變體，所述變體缺乏半胱氨酸殘基，前提是所述蛋白質不是α-乳清蛋白。

發現肽的精確序列不是關鍵之處，反而包含α-螺旋結構域通常足以提供活性復合物是意料之外的。

如本文所用，術語“α-螺旋結構域”是指肽的二級結構中的基序，其中形成右旋的卷曲構象或盤旋構象(螺旋)，其中每個主鏈N-H基團提供一個氫鍵給沿著肽序列位于前三個或四個殘基的氨基酸的主鏈C＝O基團。