[發明專利]表達抗原結合受體和嵌合共刺激受體的免疫細胞

在審

• 申請號: 201780076500.5
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN110062768A
• 公開（公告）日: 2019-07-26
• 發明（設計）人: D·洛克;M·阿森馬赫爾;A·凱澤
• 申請（專利權）人: 美天旎生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/44
• 分類號: C07K16/44;A61K35/15;C07K16/28
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;劉盈盈

本發明提供一種包含特異于標簽多肽的標簽的嵌合抗原受體(CAR)和特異于進一步抗原的嵌合共刺激受體(CCR)的免疫效應細胞，其中所述多肽結合靶細胞的抗原。CCR不能夠獨自介導所述免疫應答，但是增強由所述CAR觸發的所述免疫效應細胞的免疫應答。

技術領域

本發明一般涉及抗原結合受體的領域，例如，在用于治療例如癌癥的病癥的免疫細胞的表面上表達的嵌合抗原結合受體(CAR)，特別是共表達嵌合共刺激受體(CCR)的免疫細胞。

背景技術

通過表達轉基因嵌合抗原受體將T細胞重定向至腫瘤抗原利用通過人類白細胞抗原(HLA)依賴性識別的有效的細胞效應機制。最近在臨床試驗中已經證實了這種方法的潛力，其中將表達CAR的T細胞輸注到患有B細胞惡性腫瘤、神經母細胞瘤和肉瘤的成人和兒科患者中。CAR是通常靶向表面分子的重組受體。CAR通常由通過間隔子/鉸鏈和跨膜結構域連接至可以包含共刺激結構域和T細胞激活部分的細胞內信號傳導結構域的細胞外抗原識別部分組成。CAR不依賴于其主要組織相容性抗原的表達而識別未加工的抗原，這與生理性T細胞受體(TCR)不同。因此，CAR T細胞可以規避腫瘤借以躲避主要組織相容性類別(MHC)限制性T細胞識別的主要機制中的一些，例如HLA表達下調或蛋白酶體抗原加工(有助于腫瘤逃脫TCR介導的免疫力的兩種機制)。CAR的另一個特征是它們不僅能夠與蛋白質結合，還能與碳水化合物、神經節苷脂、蛋白多糖和高度糖基化的蛋白質結合，從而擴大潛在靶標的范圍。CAR通過抗原識別部分與靶標結合，所述抗原識別部分通常是來源于抗體或Fab片段的單鏈可變片段(scFv)(例如在Dai等,2016,J Natl Cancer Inst 108(7):djv439中綜述)。

WO2014/055657A1中公開了包含核酸分子的反式信號傳導組合物，所述核酸分子包含編碼第一CAR和第二CAR的序列，其中第一CAR包含第一抗原結合結構域、第一跨膜結構域和共刺激分子的胞內結構域，并且其中第二CAR包含第二抗原結合結構域、第二跨膜結構域和T細胞受體的胞內結構域，通常是單獨的CD3ζ信號傳導結構域。第一抗原結合結構域結合第一靶標，第二抗原結合結構域結合第二靶標，其中第一和第二靶標各自是與實體腫瘤相關的腫瘤抗原。僅當在T細胞中來自第一CAR的T細胞受體的胞內結構域具有活性并且來自第二CAR的共刺激分子的胞內結構域具有活性時，才發生足夠的CAR T細胞激活。所公開的CAR系統的缺點是，在不利的和免疫抑制性實體腫瘤的微環境中，CAR T細胞應答非常難以激發和維持。

在WO2014/055668A1中公開了免疫應答細胞，其包含：a)以低親和力結合第一抗原的抗原識別受體，其中受體與第一抗原的結合激活免疫應答細胞，和b)結合第二抗原并且刺激免疫應答細胞的嵌合共刺激受體(CCR)。抗原識別受體的胞內信號傳導結構域僅由CD3ζ信號傳導結構域組成。通過抗原識別受體與第一抗原的結合對免疫應答細胞的激活引起細胞中信號轉導的誘導或蛋白質表達的改變，其僅導致免疫應答的啟動。通過CCR與第二抗原的結合對免疫應答細胞的刺激引起信號，所述信號在免疫細胞激活后導致強烈且持續的免疫應答，這對于獨自激活的第一受體是不可能的。抗原選自腫瘤抗原或病毒抗原。

WO2015/07547A1中公開了在細胞表面共表達第一嵌合抗原受體(CAR)和第二CAR的T細胞，每個CAR包含：(i)抗原結合結構域，(ii)間隔子，(iii)跨膜結構域，和(iv)內結構域(endodomain)，其中第一和第二CAR的抗原結合結構域結合不同的抗原，并且其中第一或第二CAR中之一是包含激活的內結構域的激活的CAR，另一CAR是包含連接(ligation-on)抑制性內結構域的抑制性CAR。

Roybal等(2016，Cell 164,1-10)工程化了組合激活的T細胞回路，其中一種抗原的合成Notch受體誘導用于第二抗原的CAR的表達。這些雙受體AND門(AND-gate)T細胞僅在雙抗原腫瘤細胞的存在下被武裝和激活。這些T細胞在體內表現出精準的治療辨識力，保留單個抗原“旁觀者”腫瘤，同時有效地清除組合抗原“疾病”腫瘤。