[發(fā)明專利]用于定量免疫組織化學(xué)的方法和系統(tǒng)

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201780076071.1
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN110337588B
• 公開（公告）日: 2023-02-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: W·德;Z(大衛(wèi))·江;A·佩達(dá)塔
• 申請（專利權(quán)）人: 文塔納醫(yī)療系統(tǒng)公司
• 主分類號: G01N33/542
• 分類號: G01N33/542;G01N33/543;G01N33/58;C12Q1/28
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 岑曉東

1.一種放大樣品中的靶蛋白生物標(biāo)志物的信號的非診斷方法,所述方法包含:

a.對該樣品應(yīng)用對該靶蛋白生物標(biāo)志物特異性的第一生物標(biāo)志物特異性結(jié)合劑；

b.對該樣品應(yīng)用對該第一生物標(biāo)志物特異性結(jié)合劑特異性的第二結(jié)合劑,該第二結(jié)合劑是與二級酶綴合的；

c.對該樣品應(yīng)用包含與半抗原綴合的酪胺分子的酪胺劑,其中在該第二結(jié)合劑的位置處該二級酶催化該半抗原沉積至該樣品上；

d.對該樣品應(yīng)用對該半抗原特異性的第三結(jié)合劑,該第三結(jié)合劑是與三級酶綴合的；并

e.對該樣品應(yīng)用可檢測模塊,其中該三級酶催化與該可檢測模塊的反應(yīng)以使得該可檢測模塊可見；

由此該可檢測模塊是使用明視野顯微術(shù)作為點狀點可見的,其中該點狀點指示該靶蛋白生物標(biāo)志物；且

其中該可檢測模塊包含酪胺-羅丹明染料。

2.權(quán)利要求1的方法,其中該樣品是組織樣品。

3.權(quán)利要求2的方法,其中該組織樣品是福爾馬林固定,石蠟包埋組織樣品。

4.權(quán)利要求1-3任一項的方法,其中該靶蛋白生物標(biāo)志物包含蛋白質(zhì),碳水化合物,核酸,脂質(zhì),翻譯后修飾,或其組合。

5.權(quán)利要求4的方法,其中該翻譯后修飾包含磷酸根修飾,香葉基修飾,乙酰基修飾,泛素修飾,碳水化合物修飾,氨甲酰基修飾,或其組合。

6.權(quán)利要求1-5任一項的方法,其中該第一生物標(biāo)志物特異性結(jié)合劑包含一級抗體。

7.權(quán)利要求6的方法,其中該一級抗體是天然的,未修飾的抗體。

8.權(quán)利要求6或權(quán)利要求7的方法,其中該一級抗體是單克隆的或多克隆的。

9.權(quán)利要求1-8任一項的方法,其中該第二結(jié)合劑包含二級抗體。

10.權(quán)利要求1-9任一項的方法,其中該二級酶包含氧化還原酶,水解酶,或過氧化物酶。

11.權(quán)利要求10的方法,其中該過氧化物酶包含辣根過氧化物酶。

12.權(quán)利要求1-11任一項的方法,其中該半抗原包含生物素,洋地黃毒苷,硝基吡唑,苯并呋咱,苯并二氮卓,硝基肉桂酰胺,或二硝基苯基。

13.權(quán)利要求1-12任一項的方法,其中該第三結(jié)合劑包含三級抗體。

14.權(quán)利要求13的方法,其中該三級抗體包含單克隆抗體。

15.權(quán)利要求1-14任一項的方法,其中該酪胺-羅丹明染料包含羅丹明110,羅丹明6G,四甲基羅丹明,磺酰羅丹明B,磺酰羅丹明101,或其組合。

16.權(quán)利要求1-15任一項的方法,其中該可檢測模塊包含DAB,4-硝基苯基磷酸酯,堅固紅,溴氯吲哚基磷酸酯,硝基藍(lán)四唑,BCIP/NBT,堅固紅,AP橙,AP藍(lán),四甲基聯(lián)苯胺,2,2’-連氮基-二-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸鹽],鄰聯(lián)茴香胺,4-氯萘酚,硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷,鄰苯二胺,5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-吡喃半乳糖苷,甲基傘形基-β-D-吡喃半乳糖苷,對硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷,5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸,3-氨基-9-乙基咔唑,品紅,碘硝基四唑四唑藍(lán),或四唑紫。

17.權(quán)利要求1-16任一項的方法,其中將該方法應(yīng)用于其中檢測和區(qū)分兩種或更多種靶蛋白生物標(biāo)志物的多路免疫組織化學(xué)測定法。

18.權(quán)利要求1-17任一項的方法,其中該靶蛋白生物標(biāo)志物是分泌的分子。