[發明專利]微生物的檢查方法及其裝置

有效

• 申請號: 201780076057.1
• 申請日: 2017-11-24
• 公開（公告）號: CN110062805B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 賀建軍;松田真典
• 申請（專利權）人: 株式會社佐竹
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/06;G01N21/64;G01N21/77;G01N21/78;G01N33/18
• 代理公司: 北京銀龍知識產權代理有限公司 11243
• 代理人: 范勝杰;曹鑫

本發明提供壓載水中的微生物檢測方法及其裝置，能夠簡便且短時間內檢測出難以吸收熒光染色試劑的植物性浮游生物。上述微生物檢測裝置具備：激勵光源(8)，其具備使激勵光連續照射到試樣容器(4)的被照射面的光源；受光單元(9)，其檢測通過來自激勵光源(8)的激勵光進行熒光發光的光；控制單元(10)，其將通過受光單元(9)檢測出的光轉換為電信號并檢測發光數來進行計數，根據發光數計算試樣容器(4)的試樣所含有的微生物量；以及操作部(3)，其與控制單元(10)電連接，激勵光源(8)使用發出使植物性浮游生物進行葉綠素熒光發光的波長區域的光的光源(8b)和發出使被熒光染色試劑染色后的微生物進行熒光發光的波長區域的光的光源(8a)這2種不同的激勵光源。

技術領域

本發明涉及微生物的檢查方法及其裝置，特別涉及適合于檢測在壓載水中含有而生存的浮游生物等微生物的微生物檢查方法及其裝置。

背景技術

沒有裝載貨物的船舶，為了使該船舶穩定而搭載壓載水來航行，在裝載貨物的海域中將上述壓載水排出。

壓載水通常被排出到與所搭載的海域不同的海域中，因此可能會將該壓載水中含有的浮游生物和細菌等微生物運送到本來的棲息地以外的海域，引起破壞生態系統等問題。

為了應對這種問題，制定與壓載水的限制相關的國際規則，采納“用于限制以及管理船舶的壓載水以及沉淀物的國際條約(壓載水管理條約)”。

與上述壓載水管理條約關聯的“與壓載水采樣相關的指南(G2)”，在“壓載水排出基準(D-2)”中，將從船舶排出的壓載水中含有并生存的生物的容許個體數，例如關于最小尺寸為50μm以上的生物(以下稱為“L尺寸生物”)規定為10個/m³以下，關于最小尺寸為10μm以上不滿50μm的生物(以下稱為“S尺寸生物”)規定為10個/mL以下，像這樣根據上述生物的最小尺寸來區分規定。

當目前為止，作為用于在排出上述壓載水時確認是否滿足上述排出標準的方法，已知使通過泵汲取到的海水通過流動室來進行圖像測量的裝置(例如專利文獻1)，在使通過泵汲取到的海水通過開口不同的過濾器后作為采樣水來采取，在其中添加染色試劑，一邊攪拌一邊照射激勵光，檢測由激勵光進行熒光發光的光并計數發光數，根據發光數計算采樣水中含有的微生物量的裝置(例如專利文獻2、專利文獻3)等。

專利文獻1記載的裝置的特征在于，具備：染色部，其流過液體的檢測體，并對該檢測體中存在的具有生物細胞的生物進行染色；濃縮部，其流過實施了上述染色的檢測體，并進行濃縮以便提高上述生物的濃度；個體測量部，其取得包括上述濃縮后的檢測體中的上述生物的個體圖像信息；以及控制單元，其根據由上述個體測量部輸出的上述個體的圖像信息來進行上述生物的測定。

這樣，能夠通過流動方式進行檢測體的液體中的生物的染色工序、液體中的生物的濃縮工序、液體中的生物的信息取得工序等，因此與通過分批方式進行各個工序的方法相比，能夠將結束了一個工序的檢測體的一部分進入到下一個工序為止的待機時間大幅縮短或設為0，因此會有以下優點：在防止待機時間內的染色狀態的惡化的意義上能夠取得穩定的生物的生死信息。

但是，上述專利文獻1記載的裝置，使通過泵汲取到的海水依次通過各種工序，裝置變成大規模，另外會有制造成本變高的問題。并且，依次通過各種工序而縮短待機時間，但是會有測定結束會至少花費幾個小時的問題。

另外，上述專利文獻2、3記載的裝置的特征在于，具備：攪拌混合單元，其在由透射光的材質形成的分批式的試樣容器中添加試樣和熒光染色液并進行試樣溶液的攪拌、混合；激勵光源，其具備通過上述攪拌混合單元攪拌上述試樣溶液并使激勵光照射到上述試樣容器的被照射面的光源；受光單元，其檢測通過來自該激勵光源的激勵光進行熒光發光的光；以及控制單元，其將通過該受光單元檢測出的光轉換為電信號并檢測發光數，根據該發光數計算上述試樣容器中的試樣所含有的微生物量。