[發明專利]高效價的多黏菌素E2

有效

• 申請號: 201780074766.6
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN109996806B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 馮軍;張喜全;吳勇;郭猛;薛春佳;胡明通;朱裕輝;周杰;王猛力
• 申請（專利權）人: 正大天晴藥業集團股份有限公司;上海醫藥工業研究院;上海多米瑞生物技術有限公司
• 主分類號: C07K7/62
• 分類號: C07K7/62;C07K1/34;C07K1/36;C07K1/16;A61K38/12;A61P31/04
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1.制備多黏菌素E₂甲磺酸鈉的方法，所述多黏菌素E₂甲磺酸鈉包含4修飾產物、6修飾產物、8修飾產物，所述4修飾產物是指在多黏菌素E₂結構中Dbu的γ氨基被4個甲磺酸鈉基取代，所述6修飾產物是指在多黏菌素E₂結構中Dbu的γ氨基被6個甲磺酸鈉基取代，所述8修飾產物是指在多黏菌素E₂結構中Dbu的γ氨基被8個甲磺酸鈉基取代，其中在HPLC圖譜中以面積歸一化法計，4修飾產物占30％-43％，6修飾產物占45％-55％，8修飾產物占7％-17％，并且，所述多黏菌素E₂甲磺酸鈉的效價為不低于660μg/mg，所述方法包括：

(1)以硫酸多黏菌素E為原料，通過層析純化得到純度≥96％的硫酸多黏菌素E₂；

(2)將步驟(1)得到的硫酸多黏菌素E₂與甲醛溶液反應，其中硫酸多黏菌素E₂與甲醛的摩爾比為1:10-20，控制反應時間為2小時；

(3)向步驟(2)的反應產物中加入亞硫酸氫鈉溶液，繼續反應，其中硫酸多黏菌素E₂與亞硫酸氫鈉的摩爾比為1:10-20，控制反應時間為18小時；

(4)通過超濾的方式純化步驟(3)的反應液，超濾膜的截留分子量在1000-4000之間，向得到的超濾截留液中加入超濾截留液3.4倍體積的水，再進行超濾，再向得到的超濾截留液中加入超濾截留液3.4倍體積的水，如此反復多次，當電導率降至2.5mS/cm時停止超濾；

(5)將步驟(4)所得的超濾截留液進行冷凍干燥，得到多黏菌素E₂甲磺酸鈉。