[發明專利]HPV特異性T細胞的制備

在審

• 申請號: 201780071272.2
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN109996869A
• 公開（公告）日: 2019-07-09
• 發明（設計）人: C·A·拉莫斯;C·M·魯尼;N·納羅拉
• 申請（專利權）人: 貝勒醫學院
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 華珊;徐迅

本發明的實施方式涉及用于人乳頭瘤病毒感染和與其相關的疾病的免疫療法的方法和組合物。在具體的實施方式中，所述方法涉及靶向HPV16和/或HPV18的一種或多種抗原的免疫細胞的產生，包括具有使用IL?7和IL?15但不使用IL?6和/或IL?12的刺激步驟的方法。其他具體實施方式中，在某些細胞(例如共刺激細胞和某些抗原呈遞細胞)存在下進行刺激。

關于聯邦政府資助的研究或開發的聲明

本發明是在國家癌癥研究所授予的P50 CA097007和PO1 CA94237的政府支持下完成的。政府擁有本發明的特定權利。

技術領域

本發明至少涉及免疫學、細胞生物學、分子生物學和包括癌癥醫學的醫學領域。

背景技術

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種DNA病毒，可在皮膚或粘膜的角質形成細胞中產生增殖性感染。有超過170種類型的HPV，其中一部分HPV類型具有致癌性，包括可發展成生殖器腫瘤的高風險性傳播類型，例如，包括宮頸上皮內瘤變(CIN)、外陰上皮內瘤變(VIN)、陰莖上皮內瘤變(PIN)和/或肛門上皮內瘤變(AIN)。當病毒序列整合到宿主細胞的細胞DNA中時，出現HPV誘發的癌癥。一些HPV“早期”基因，例如E6和E7，充當促進腫瘤生長和惡性轉變的致癌基因。

Ramos等人(J Immunother 2013；36：66-76)描述了一種刺激外周血單核細胞以產生對HPV16E6和E7特異的T細胞的方法。簡而言之，所述方法包括用樹突細胞對外周血單核細胞刺激，其中細胞在含有或不含有細胞因子IL-6、IL-7、IL-12和IL-15的組合的CTL培養基中培養。所述方法還包括第二次刺激,其中共培養物被補充IL-2，以及輕微的刺激，其中在IL-15存在下每周用載有肽混合物(pepmix)的輔助抗原呈遞細胞(例如，B-細胞)進行刺激。該文獻教導了細胞因子IL-6、IL-7、IL-12和IL-15的組合對于從患者樣品中擴增HPV特異性T細胞以獲得可檢測的T細胞應答是必需的。

本發明減輕了本領域長期以來對治療HPV相關疾病(例如至少包括與HPV16和HPV18相關的疾病)的需求。

發明概述

本發明的目的是提供關于經修飾以產生免疫性地識別特定靶標的免疫系統細胞的方法和組合物。在一些實施方式中，本發明涉及靶向引起個體免疫應答的生物部分的免疫細胞(包括細胞毒性T淋巴細胞(CTL，也稱為細胞毒性T細胞))的發展。在具體的實施方式中，本發明涉及靶向HPV抗原(包括HPV疾病相關抗原)的細胞毒性T細胞的發展。在一些情況下，產生細胞毒性T細胞的混合物，并且在一些情況下，所述混合物靶向不只一種HPV抗原，包括不只一種HPV型的不只一種抗原。

本發明的實施方式涉及向感染HPV或具有HPV相關疾病(例如包括癌癥)的個體提供治療的方法和組合物。“HPV相關疾病”可以是一種由HPV感染引起或加劇的疾病、一種HPV感染是其危險因素的疾病,和/或一種HPV感染與其發作、發展、進展或嚴重程度正相關的疾病。HPV相關疾病可以是本發明的方法和組合物提供治療效果(例如，抑制疾病的發展/進展、延遲/預防疾病的發作、減輕疾病癥狀的嚴重性、疾病癥狀的逆轉和/或存活率增加)的疾病。本領域技術人員應當清楚的是，本發明的方法和組合物的治療用途基本上延伸到任何可受益于HPV感染細胞數量減少的疾病/病癥。在具體的實施方式中，本發明涉及用于可以靶向HPV相關的(例如，HPV16相關的和/或HPV18相關的)醫學病癥(包括癌癥)并且是其治療藥物的過繼性細胞免疫療法的方法和組合物。

在某些方面，本發明涉及靶向來自HPV(例如HPV16和/或HPV18)的抗原的多個T細胞的開發。本發明提供了用于產生具有特異性針對HPV(例如HPV16和/或HPV18抗原)的T細胞系的方法的顯著且非顯而易見的改進。