[發明專利]多級色譜分析方法及分析系統

在審

• 申請號: 201780069677.2
• 申請日: 2017-11-15
• 公開（公告）號: CN109923413A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 浜瀨健司;古賀鈴依子;三田真史
• 申請（專利權）人: 株式會社資生堂
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/02;G01N30/44;G01N30/46
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 王磊;段承恩

本發明的目的是提供針對包含光學異構體的試樣的更準確的分析方法和系統。其特征在于，參照色譜的結果，在從開始從基線隆起的時刻到回歸基線的結束時刻為止，將達到與對應于其它的1個或多個成分的色譜峰的完全分離的流分分別依次分取，在未達到對單一成分完全分離的情況下，將分取流分進一步供于色譜，在達到完全分離的情況下，將分取流分供于手性色譜。

技術領域

本發明涉及采用色譜法對試樣中的多個成分的光學異構體進行分析的分析方法、以及執行該分析方法的分析系統。

背景技術

色譜法是使用導入到分析系統內的流動相、和被保持于柱等的固定相，在分析系統內與流動相一起導入包含多個成分的試樣，利用流動相內的各成分與固定相的物理、化學相互作用的差別而將多個成分進行分離、檢測的方法。

然而，如果要對物理、化學性質近似的多個成分進行分析，則在沒有通過與固定相的相互作用而被充分分離的情況下進行溶出，色譜峰會發生重疊。其結果，對于單一分離系統，有時不能將試樣所包含的多個成分精密分離。

因此，廣泛采用了將通過色譜儀進行了分離、分級的成分進一步通過包含其它流動相和固定相的另一個色譜儀進行分離的分析方法。以下，將其稱為2級色譜分析方法。

作為2級色譜分析方法，一般而言，分取通過第1級色譜儀分離出的包含目標成分的色譜峰流分，導入到第2級色譜將目標成分精密分離。在該情況下，有在串聯的裝置中切換柱的方法(在線柱轉換法)、和在分析系統外暫時分取流分并導入到其它裝置系統的方法(離線柱轉換法)。

這些方法中，在一個分析系列中僅可以對一個目標成分進行分離，因此在以多個成分作為對象的情況下必須根據其數量而增加分析系列、分析次數，目標成分數越多則越需要勞力和時間。此外，對于如生物體試樣那樣量受限的試樣，分析次數也產生限度，存在不能對全部目標成分進行分析的狀況。

為了解決這樣的問題，開發了將2個柱、與分別保持被分離出的流分的多回路組合，能夠同時·一起·自動進行多個成分的分析的2級液相色譜方法以及系統(專利文獻1)。此外開發了將在通過第1級的色譜而分離出的各成分的峰的從開始從基線隆起的時刻到回歸基線的結束時刻為止期間的時間被分級的成分向保持部逐次分取，將分取完成的成分供于第2級的色譜分析的液相色譜系統(專利文獻2)。

這里，專利文獻1和2意圖是將通過1級的色譜難以分離的光學異構體通過第2級的色譜進行分離。專利文獻2中，雖然公開了將在各成分的峰的從開始從基線隆起的時刻到回歸基線的結束時刻為止期間被分級的成分向保持部逐次分取，但是其前提是分析目標的各成分與光學異構體以外的成分相互不具有峰的重疊。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本專利第4291628號公報

專利文獻2：日本專利第4980740號公報

專利文獻3：日本特開2015-48332號公報

發明內容

發明所要解決的課題

通過以往的2級色譜，能夠將多個成分的光學異構體分離進行定量。然而，本發明人等發現下述課題：例如如生物體中的試樣中包含的氨基酸那樣，存在大量復雜的基質成分，并且在一種光學異構體與其它光學異構體相比存在量大不相同的情況下、由溫度等條件差異引起的略微的保留時間的波動等而產生的色譜峰的重疊有時會引起相對少的光學異構體的測定值發生變動。

用于解決課題的方法