[發(fā)明專利]用于人肝細(xì)胞異種移植的遺傳修飾小鼠模型

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201780066623.0
• 申請(qǐng)日: 2017-10-27
• 公開（公告）號(hào): CN109923124A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: L·D·舒爾茲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杰克遜實(shí)驗(yàn)室
• 主分類號(hào): C07K14/81
• 分類號(hào): C07K14/81;C12N5/071;C12N15/113;C12N15/86
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所 11256
• 代理人: 陳文平;袁元

1.一種免疫缺陷小鼠，其被遺傳修飾以包含編碼人α-1抗胰蛋白酶(AAT)的PiZ變體(Glu342Lys)的基因，其中所述小鼠表達(dá)所述人α-1抗胰蛋白酶的PiZ變體(Z-AAT)，并且其中所述小鼠具有與不表達(dá)Z-AAT的相同類型的免疫缺陷小鼠相比數(shù)量減少的小鼠肝細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫缺陷小鼠，其中所述免疫缺陷小鼠是遺傳修飾的NSG、NRG或NOG小鼠。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫缺陷小鼠，其中所述免疫缺陷小鼠的肝細(xì)胞表達(dá)Z-AAT。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的免疫缺陷小鼠，其還包含含有肝細(xì)胞的異種移植物或同種異體移植物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的免疫缺陷小鼠，其中所述異種移植物包含人肝細(xì)胞。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的免疫缺陷小鼠，其中所述人肝細(xì)胞表達(dá)人血清白蛋白。

7.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任一項(xiàng)所述的免疫缺陷小鼠，其中所述異種移植物的所述肝細(xì)胞包含標(biāo)志蛋白。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的免疫缺陷小鼠，其中所述標(biāo)志蛋白是綠色熒光蛋白或其熒光類似物。

9.根據(jù)權(quán)利要求4至8中任一項(xiàng)所述的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠的至少約25％的肝細(xì)胞是移植的人肝細(xì)胞。

10.根據(jù)權(quán)利要求5至9中任一項(xiàng)所述的免疫缺陷小鼠，其中所述人血清白蛋白在所述小鼠的血液中是可檢測的。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的免疫缺陷小鼠，其包含存在于所述小鼠的血清中的至少約0.01mg/mL的人血清白蛋白。

12.根據(jù)權(quán)利要求5至11中任一項(xiàng)所述的免疫缺陷小鼠，其中所述人肝細(xì)胞表達(dá)野生型人AAT。

13.根據(jù)權(quán)利要求13所述的免疫缺陷小鼠，其包含存在于所述小鼠的血清中的至少約100μg/mL的野生型人AAT。

14.根據(jù)權(quán)利要求4至13中任一項(xiàng)所述的免疫缺陷小鼠，其中所述異種移植物或同種異體移植物的肝細(xì)胞是基因組編輯的肝細(xì)胞。

15.一種制備包含移植的外源性肝細(xì)胞的遺傳修飾的免疫缺陷小鼠的方法，所述方法包括：

提供根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的遺傳修飾的免疫缺陷小鼠；和

施用人或同種異體肝細(xì)胞至所述小鼠。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述人或同種異體肝細(xì)胞是原代肝細(xì)胞。

17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的方法，其中施用人或同種異體肝細(xì)胞至所述遺傳修飾的免疫缺陷小鼠包括注射所述肝細(xì)胞。

18.根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項(xiàng)所述的方法，其中施用人或同種異體肝細(xì)胞至所述遺傳修飾的免疫缺陷小鼠包括脾內(nèi)施用所述肝細(xì)胞。

19.根據(jù)權(quán)利要求15至18中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述肝細(xì)胞表達(dá)標(biāo)志蛋白。

20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述標(biāo)志蛋白是綠色熒光蛋白或其熒光類似物。

21.根據(jù)權(quán)利要求15至20中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括處理所述遺傳修飾的免疫缺陷小鼠以減少內(nèi)源性小鼠肝細(xì)胞。