[發明專利]蛋白質-納米顆粒偶聯物純化方法

在審

• 申請號: 201780060705.4
• 申請日: 2017-09-25
• 公開（公告）號: CN109843790A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發明（設計）人: 廖加利;C·貝利斯勒
• 申請（專利權）人: 生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: B82Y15/00
• 分類號: B82Y15/00;C07K1/34;C07K16/00;G01N33/53
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳揚揚;陶啟長

1.一種純化蛋白質-納米顆粒偶聯物的方法，所述方法包括：

使蛋白質-納米顆粒偶聯物，游離蛋白質和緩沖劑的混合物與多模式介質接觸以將蛋白質-納米顆粒偶聯物與游離蛋白質分離，其中所述多模式介質具有尺寸排阻模式和捕獲模式；并且

從介質中收集蛋白質-納米顆粒偶聯物，從而純化蛋白質-納米顆粒偶聯物。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述多模式介質包含多糖并且具有包埋在其中的羥基磷灰石微晶。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述多模式介質包含多糖并且具有用疏水且帶正電荷的配體官能化的芯。

4.如權利要求3所述的方法，其中所述配體中的一個或多個是辛胺。

5.如權利要求3所述的方法，其中所述介質還包含基于多糖的外殼。

6.如權利要求1所述的方法，其中所述多模式介質包含丙烯酰胺。

7.如權利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述混合物還包含表面活性劑。

8.如權利要求7所述的方法，其中所述表面活性劑是聚亞烷基二醇。

9.如權利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述收集步驟包括從介質中收集富含蛋白質-納米顆粒偶聯物的一個或多個級分。

10.如權利要求1-9中任一項所述的方法，其中所述收集步驟包括向介質施加離心力或真空，并從介質中收集富含蛋白質-納米顆粒偶聯物的一個或多個級分。

11.如權利要求2或3所述的方法，其中所述多糖是瓊脂糖。

12.如權利要求5所述的方法，其中所述外殼包含瓊脂糖。

13.如權利要求1-12中任一項所述的方法，其中所述蛋白質是IgG抗體。

14.如權利要求1-13中任一項所述的方法，其中所述納米顆粒是聚合物點。

15.如權利要求14所述的方法，其中所述聚合物點的直徑為5-100nm并且是膠體半導體聚合物。

16.如權利要求15所述的方法，其中所述聚合物點是熒光的。

17.如權利要求7所述的方法，其中所述表面活性劑是Pluronic F-68。

18.如權利要求7或8所述的方法，其中所述混合物中的表面活性劑濃度為0.02％-1.0％。

19.如權利要求1-18中任一項所述的方法，其中所述混合物還包含游離納米顆粒并且所述介質將游離納米顆粒與偶聯物分離。

20.一種從游離蛋白質純化蛋白質-納米顆粒偶聯物的試劑盒，所述試劑盒包含：

柱；和

具有尺寸排阻模式和捕獲模式的多模式介質。

21.如權利要求20所述的試劑盒，其中所述多模式介質包含多糖并且具有包埋在其中的羥基磷灰石微晶。

22.如權利要求20所述的試劑盒，其中所述多模式介質包含多糖并且具有用疏水且帶正電荷的配體官能化的芯。

23.如權利要求22所述的試劑盒，其中所述配體中的一個或多個是辛胺。