[發明專利]具有降低的免疫原性的HLA I類缺陷的NK-92細胞

在審

• 申請號: 201780060685.0
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN109804064A
• 公開（公告）日: 2019-05-24
• 發明（設計）人: F·納瓦羅;H·克林格曼
• 申請（專利權）人: 南克維斯特公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N15/10;C12N15/113;C12N9/22;C07K14/74;A61K35/17
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;徐志明

1.一種β-2-微球蛋白-修飾的(B2M-修飾的)NK-92細胞，其包含靶向β-2微球蛋白的遺傳修飾以抑制β-2微球蛋白的表達。

2.如權利要求1的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述細胞通過敲低或敲除NK-92細胞中的β-2微球蛋白產生。

3.如權利要求2的B2M-修飾的NK-92細胞，包含靶向B2M且抑制其表達的干擾RNA。

4.如權利要求1的B2M-修飾的NK-92細胞，其中由所述細胞表達的β-2-微球蛋白的量與不具有所述靶向β-2-微球蛋白的改變的NK-92細胞相比降低至少50％，至少60％，至少70％或至少80％。

5.如權利要求1的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述細胞通過敲除NK-92細胞中的β-2微球蛋白產生。

6.如權利要求2的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述細胞被修飾以表達包含HLA-E結合肽、B2M和HLA-E重鏈的單鏈三聚體。

7.如權利要求6的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述單鏈三聚體包含B2M(β2微球蛋白)信號肽、Cw*0304前導肽、成熟B2M多肽和成熟HLA-E多肽。

8.如權利要求7的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述Cw*0304前導肽通過柔性接頭連接于所述成熟B2M多肽和/或所述成熟B2M多肽通過柔性接頭連接于所述成熟HLA-E多肽。

9.如權利要求8的B2M-修飾的NK-92細胞，其中將所述C2*0304前導肽連接于所述成熟B2M多肽的所述柔性接頭和/或將所述成熟B2M多肽連接于所述成熟HLA-E多肽的所述柔性接頭包含Gly和Ser。

10.如權利要求6的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述HLA-E重鏈包含成熟HLA-E^G氨基酸序列。

11.如權利要求6的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述單鏈三聚體包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列。

12.如權利要求1的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述B2M-修飾的NK細胞表達至少一種Fc受體或至少一種嵌合抗原受體(CAR)；或者細胞表面上的至少一種Fc受體和至少一種CAR。

13.如權利要求12的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述至少一種Fc受體是人CD16或在對應于成熟形式的CD16多肽的158位的位置處具有纈氨酸的人CD16多肽。

14.如權利要求12的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述至少一種Fc受體，包含編碼與SEQID NO:5的氨基酸序列具有至少90％序列同一性的多肽的多核苷酸序列，且包含158位的纈氨酸。

15.如權利要求12的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述至少一種Fc受體是FcγRIII。

16.如權利要求12的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述CAR包含FcεRIγ的胞質結構域。

17.如權利要求12的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述CAR靶向腫瘤相關抗原。

18.如權利要求1的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述細胞進一步修飾以表達細胞因子。

19.如權利要求18的B2M-修飾的NK-92細胞，其中所述細胞因子是白介素-2或其變體。