[發明專利]用于樣品分析的裝置和方法

有效

• 申請號: 201780056500.9
• 申請日: 2017-09-14
• 公開（公告）號: CN109715646B
• 公開（公告）日: 2023-02-10
• 發明（設計）人: S·洛朗松;M·A·海登;J·B·赫夫;A·費希爾;J·魯濱遜;S·R·霍萊茨-麥科馬克
• 申請（專利權）人: 雅培實驗室
• 主分類號: C12Q1/6853
• 分類號: C12Q1/6853;C07H21/02;C12N15/09
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 譚瑋

1.一種用于檢測流體樣品中靶核酸的存在的方法，所述方法包含：

(a)通過擴增來擴增所述樣品中的所述靶核酸以產生擴增產物，

其中所述擴增將標簽并入到所述擴增產物中，

其中所述擴增包含至多15個擴增循環；

(b)在液滴中的多個捕獲物體上捕獲所述擴增產物，每個捕獲物體包含特異性結合到所述標簽的一個或多個結合成員，從而產生包含捕獲物體-擴增產物的復合物；

(c)可檢測地標記所述復合物中的所述擴增產物以產生可檢測標記復合物；

(d)將含有所述捕獲物體的液滴空間上分隔到井陣列中以使得每個井含有不超過一個捕獲物體；且

(e)檢測所述井陣列中所述可檢測標記復合物的存在，

其中所述標簽和所述特異性結合到所述標簽的結合成員的組合選自抗體-抗原；抗體-半抗原；受體-配體；蛋白質-輔因子；酶-輔因子和蛋白質-配體；

其中所述方法使用集成數字微流體和分析物檢測裝置執行，所述裝置包含擴增模塊和分析物檢測模塊；

所述擴增模塊被配置成執行步驟(a)；且

所述分析物檢測模塊被配制成執行步驟(b)至(e)，所述分析物檢測模塊包括：

第一襯底和第二襯底，其中第二襯底定位于第一襯底上方且與第一襯底由間隙分離；第一襯底包括定位于第一襯底的上部表面上的一系列電極，且第一襯底包含引入液體液滴的近側部分和移動液體液滴所朝向的遠側部分；且井陣列定位于第一襯底的遠側部分中，其中定位于遠側部分中的井陣列不延伸到第一襯底的近側部分；

其中所述一系列電極操縱含有捕獲物體的液滴和含有試劑的液滴，用于標記和檢測擴增產物，將捕獲物體在步驟(d)能夠空間上分隔到井陣列中，使得在井陣列中的每個井含有不超過一個捕獲物體。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含少于14個擴增循環。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含少于13個擴增循環。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含少于12個擴增循環。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含少于11個擴增循環。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含少于10個擴增循環。

7.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含5到15個擴增循環。

8.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含5到13個擴增循環。

9.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含6到15個擴增循環。

10.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含6到10個擴增循環。

11.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含8到15個擴增循環。

12.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含8到13個擴增循環。

13.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增包含8到10個擴增循環。

14.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增產生1000個或更多個分子的所述擴增產物。

15.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增產生3000個或更多個分子的所述擴增產物。

16.根據權利要求1所述的方法，其中所述擴增產生6000個或更多個分子的所述擴增產物。