[發明專利]用于免疫療法的T細胞組合物

在審

• 申請號: 201780053540.8
• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN109715788A
• 公開（公告）日: 2019-05-03
• 發明（設計）人: A.E.斯萊恩茨;T.Y.納卡加瓦;M.A.赫爾曼
• 申請（專利權）人: 金紐斯生物科技公司
• 主分類號: C12N5/078
• 分類號: C12N5/078;C12N5/0783;C12N5/0786;C07K14/54;C07K14/55;A61K35/17
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 羅文鋒;黃希貴

本發明涉及包含異質T細胞群體的組合物，所述T細胞群體對適用于過繼性免疫療法的選定抗原具有反應性；以及用于制備T細胞組合物的方法。

技術領域

本發明涉及包含異質T細胞群體的組合物，所述T細胞群體對適用于過繼性免疫療法的選定抗原具有反應性；以及用于制備T細胞組合物的方法。

背景技術

在人的免疫系統首次看到抗原后的幾天時期內，產生識別所述抗原的T細胞群體，并且這些T細胞此后確定對所述抗原的應答的性質。T細胞的抗原識別和特異性由細胞表面上表達的T細胞受體(TCR)的結構特征賦予。單一T細胞具有能夠結合至與特異性主要組織相容性復合物分子或MHC組合呈遞的單一抗原的TCR。因此，T細胞的抗原特異性的特征在于由細胞表現出的特異性TCR的存在和功能。雖然涉及多種細胞亞型，但通常出現的T細胞的特征在于各種細胞表面標志物(CD4+：TH1、TH2、Treg、T濾泡輔助、TH17、TH22、TH9；CD8+：CTL等)并且正是由于這些不同細胞亞型的功能，產生細胞或體液免疫應答。此外，所述群體中某些T細胞亞群是免疫抑制性的(例如，Treg、TH17、無變應性(anergized)的T細胞)，并且它們的存在可誘導免疫耐受。

早在20世紀90年代，離體擴增的抗原特異性T細胞的過繼轉移顯示出賦予針對CMV和EBV的免疫性。(Riddell等人Science 1992；257:238)(Rooney等人Blood 1998；92:1549–55)。然而，在腫瘤進展過程中，對腫瘤的免疫應答集中在少數“顯性”抗原上，所述抗原在促進腫瘤消退方面無效。在使用離體擴增的T細胞用于免疫療法的過去嘗試中，腫瘤相關的顯性抗原反應性T細胞被無意地擴增，從而導致結果的不一致性。

在Kawakami等人的研究中，大多數黑素瘤患者表現出針對人黑素細胞特異性抗原(MART-1/Melan A)的細胞毒性T淋巴細胞(CTL)活性，但僅少數針對另一種腫瘤相關抗原gp100。當腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)用于過繼療法時，腫瘤消退與gp100反應性T細胞相關，而不是與MART-1反應性T細胞相關。(Kawakami Y.等人,J.Immunol.1995,154(8):3961-8)。在另一項研究中，用癌抗原免疫黑素瘤患者增加循環CD8+CTL的數量，但不與腫瘤消退相關。(Rosenberg等人,1998,Nature Medicine 4:321)。

這些不一致涉及以下事實：腫瘤微環境是復雜的并且主要通過下調T細胞的細胞毒性作用促進腫瘤存活。調控性T細胞(或Treg)介導的致耐受性應答發展，并且通常主要針對表現出高豐度、高親合力的腫瘤浸潤性T細胞，所述T細胞識別免疫顯性腫瘤抗原。另外，抗原的喪失可能產生，從而提供腫瘤逃避免疫反應性的手段。因此，當從腫瘤(即TIL)中分離的T細胞針對高抗原識別和擴增進行離體選擇且然后重新輸注在患者體內時，所述細胞主要針對一種或多種顯性腫瘤抗原，從而產生腫瘤負荷的僅暫時降低。即使當靶向多種抗原的T細胞群體用于治療方案中時，腫瘤也可能變得對隨后的施用難治(Rosenberg等人,J.Immunother.2003,26(5):385-393)。先前研究還指出，過繼性T細胞療法的益處通過先前淋巴消減來抵消遏制性淋巴細胞功能而增強。在早期病例中，用化學療法預處理宿主增加了對隨后免疫療法的應答(Dudley M.E.等人,Science.2002,10月25日；298(5594):850-4；Dudley M.E.等人,J.Clin.Oncol.,2005,4月1日；23(10):2346-57)；(美國專利8,034,334)。

因此，仍然需要更好的過繼性T細胞療法。

發明內容

在一方面，本發明提供了一種用于制備可用于過繼性細胞療法的組合物的方法，所述過繼性細胞療法富含對一種或多種靶抗原具有反應性的T細胞。在一個實施方案中，本發明提供了一種用于制備包含T細胞的組合物的方法，所述方法包括以下步驟：

(a)獲得包含T細胞的初始細胞群體；