[發(fā)明專利]用于對混合物中的個體抗體進行量化的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201780050583.0
• 申請日: 2017-08-08
• 公開（公告）號: CN109641050A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發(fā)明（設計）人: 劉定江;羅林;徐龍
• 申請（專利權）人: 里珍納龍藥品有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;B01D15/30;C07K16/00;C07K16/06
• 代理公司: 上海和躍知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 31239
• 代理人: 余文娟

本公開特別地涉及一種對包含兩種或更多種抗體分子的混合物的抗體分子的量進行量化的方法，所述方法包括：通過疏水作用色譜高效液相色譜法(HIC?HPLC)分離所述混合物的所述兩種或更多種抗體分子的每一者；和對每種抗體分子的量進行量化；其中每種抗體分子的分子量在所述混合物中的任何其它抗體分子的15kDa內(nèi)，并且每種抗體分子與所述混合物中的另一種抗體分子在Kyte&Doolittle疏水度標度上相差約0.25單位以上，或所述抗體分子的每一者當以HIC?HPLC單獨地運行時以與所述混合物中的其它抗體分子不同的略微重疊運行時間洗脫，或上述兩者。

相關申請的交叉引用

本專利申請要求享有于2016年8月16日提交的美國臨時申請No.62/375,887的優(yōu)先權，該臨時申請全文以引用方式并入本文。

技術領域

本公開涉及對于治療抗體的共制劑的測定領域。

發(fā)明背景

多種而非單種單克隆抗體(mAb)至患者的施用可改善其診斷或治療表征和效率。這些mAb可在單種藥物產(chǎn)品(DP)中進行共配制，并且DP施用至患者。

管理機構(gòu)需要一種方法來使待并入DP的共配制藥物物質(zhì)(cFDS)中或DP自身中的個體mAb量化。開發(fā)一種用以分離兩種或更多種抗體分子并且測量每種mAb的濃度的方法具有挑戰(zhàn)性，因為抗體分子可具有類似分子量、蛋白結(jié)構(gòu)和電荷性質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本公開包括一種使包含多種抗體的混合物的抗體的量量化的方法。在一些方面，該方法可包括以下步驟：利用疏水作用色譜高效液相色譜法(HIC-HPLC)分離混合物中的多種抗體的每一者；使混合物中的每種抗體的量量化；其中混合物中的每種抗體的分子量在混合物中的任何其它抗體的分子量的15kDa內(nèi)，并且混合物中的每種抗體的表面疏水性與混合物中的另一種抗體的表面疏水性在Kyte&Doolittle疏水度標度上相差約0.25單位以上，或混合物中的每種抗體當以HIC-HPLC單獨地運行時以與混合物中的另一種抗體不同的運行時間洗脫，或兩者。

在一些實施例中，混合物中的每種抗體的表面疏水性與混合物中的每種其它種抗體的表面疏水性在Kyte&Doolittle疏水度標度上相差約0.5至約1.0單位。在另外實施例中，混合物中的每種抗體的表面疏水性通過以下項來確定：基于蛋白結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)模型而計算表面疏水性，對于硫酸銨或PEG 8000中的溶解度的快速篩選，或通過親和性自捕獲作用納米粒子光譜法(AC-SINS)對于分子作用的快速篩選。

在額外實施例中，混合物中的第一抗體在HIC-HPLC運行期間以第一運行時間洗脫，混合物中的第二抗體在HIC-HPLC運行期間以第二運行時間洗脫，并且第一運行時間和第二運行時間不重疊。在另外實施例中，混合物中的第一抗體和混合物中的第二抗體具有至少90％同源性的蛋白序列；第一抗體和第二抗體具有至少90％同源性的蛋白結(jié)構(gòu)，如通過其蛋白序列所確定；或第一抗體和第二抗體具有彼此約0.6內(nèi)的等電位點(pI)，如通過其蛋白序列所確定。

在一些實施例中，多種抗體包括三種抗體。在另外實施例中，混合物中的抗體的一者或多者為單克隆抗體。在另外實施例中，混合物中的抗體的一者或多者為人單克隆抗體。在其它實施例中，混合物中的抗體的兩者或更多者為相同同種型。在一些實施例中，混合物中的抗體的兩者或更多者為彼此的變體。在另外實施例中，混合物中的抗體的兩者或更多者結(jié)合至相同抗原。

在一些實施例中，混合物為共配制組合物。在額外實施例中，共配制組合物配置成治療人患者的MERS。在另外實施例中，共配制組合物配置成治療人患者的埃博拉出血熱。在另外實施例中，共配制組合物配置成治療人患者的黃斑變性。在另外實施例中，共配制組合物中的兩種或更多種抗體配置成治療人患者的感染性疾病。在一些實施例中，共配制組合物包含于藥物產(chǎn)品中。