[發明專利]用于對混合物中的個體抗體進行量化的方法

在審

• 申請號: 201780050583.0
• 申請日: 2017-08-08
• 公開（公告）號: CN109641050A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發明（設計）人: 劉定江;羅林;徐龍
• 申請（專利權）人: 里珍納龍藥品有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;B01D15/30;C07K16/00;C07K16/06
• 代理公司: 上海和躍知識產權代理事務所(普通合伙) 31239
• 代理人: 余文娟

1.一種對包含多種抗體的混合物的抗體的量進行量化的方法，所述方法包括：

利用疏水作用色譜高效液相色譜法(HIC-HPLC)分離所述混合物中的所述多種抗體的每一者；和

對所述混合物中的每種抗體的量進行量化；

其中所述混合物中的每種抗體的分子量在所述混合物中的任何其它抗體的分子量的15kDa內，并且所述混合物中的每種抗體的表面疏水性與所述混合物中的另一種抗體的表面疏水性在Kyte&Doolittle疏水度標度上相差約0.25單位以上，或所述混合物中的每種抗體當以HIC-HPLC單獨地運行時以與所述混合物中的另一種抗體不同的運行時間洗脫，或上述兩者。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的每種抗體的所述表面疏水性與所述混合物中的每種其它種抗體的所述表面疏水性在所述Kyte&Doolittle疏水度標度上相差約0.5至約1.0單位。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的第一抗體在HIC-HPLC運行期間以第一運行時間洗脫，所述混合物中的第二抗體在所述HIC-HPLC運行期間以第二運行時間洗脫，并且所述第一運行時間和所述第二運行時間不重疊。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述HIC-HPLC在約pH5.0至約pH7.0的緩沖液中執行。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述多種抗體包含三種抗體。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的每種抗體的所述表面疏水性通過選自以下項所構成的組中的一種或多種方法來確定：基于蛋白結構或結構模型而計算表面疏水性，對于硫酸銨或PEG 8000中的溶解度的快速篩選，或通過親和性自捕獲作用納米粒子光譜法(AC-SINS)對于分子作用的快速篩選。

7.根據權利要求1所述的方法，其中：

所述混合物中的第一抗體和所述混合物中的第二抗體具有至少90％同源性的蛋白序列；

所述第一抗體和所述第二抗體具有至少90％同源性的蛋白結構，如通過其蛋白序列所確定；或

所述第一抗體和所述第二抗體具有彼此約0.6內的等電位點(pI)，如通過其蛋白序列所確定。

8.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的所述抗體的一者或多者為單克隆抗體。

9.根據權利要求8所述的方法，其中所述混合物中的所述單克隆抗體的一者或多者為人單克隆抗體。

10.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的所述抗體中的兩者或更多者為相同同種型。

11.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的所述抗體中的兩者或更多者為彼此的變體。

12.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物中的所述抗體的兩者或更多者結合至相同抗原。

13.根據權利要求1所述的方法，其中所述混合物為共配制組合物。

14.根據權利要求13所述的方法，其中所述共配制組合物配置成治療人患者的MERS。

15.根據權利要求13所述的方法，其中所述共配制組合物配置成治療人患者的埃博拉出血熱。

16.根據權利要求13所述的方法，其中所述共配制組合物配置成治療人患者的黃斑變性。

17.根據權利要求13所述的方法，其中所述共配制組合物中的所述兩種或更多種抗體配置成治療人患者的感染性疾病。