[發明專利]制備脂質體的方法

在審

• 申請號: 201780047019.3
• 申請日: 2017-08-01
• 公開（公告）號: CN109562067A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: I·雅韋里;K·內拉雅潘
• 申請（專利權）人: 庫里爾克思股份有限公司
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K9/19;A61K9/16;A61K31/165;A61K38/40;A61K31/352;A61K38/13;C07K16/32;C07K16/24
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健

本文提供了制備脂質體的方法及其用途。在某些實施方案中，在該方法中制備脂質體而不使用加熱、有機溶劑、蛋白質和/或無機鹽。在某些實施方案中，脂質體制備物含有一種或多種活性劑。在某些實施方案中，脂質體制劑用于治療疾病或病癥。

背景技術

制藥藥物的生物利用度在很大程度上取決于藥物的溶解度和穩定性。已經采用許多方法來提高藥物的生物利用度，包括但不限于pH調節、將藥物與洗滌劑的膠束結合、在有機溶劑中溶解、與環糊精或其它聚合物絡合、以及將藥物包封在脂質體雙層中(Strickley,R.G.,Pharmaceutical Research,No.21,2004:201-230)。藥物本身或用于溶解藥物的賦形劑可能具有副作用，例如過敏反應或溶血。

已知溶劑(例如乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲亞砜(“DMSO”)、絡合劑(例如煙酰胺)和表面活性劑(例如油酸鈉)是溶血性的，因此不適合用于可注射溶液。在可注射產品中使用有機溶劑的其他限制包括注射時的沉淀、疼痛和炎癥。

脂質體是微觀脂質囊泡，其由中心水性腔組成，所述中心水性腔被由(一或多層)同心雙層(片層)形成的脂質膜包圍。脂質體能夠摻入親水性物質(在水性內部)或疏水性物質(在脂質膜中)。脂質體可以是具有單個脂質雙層的單層囊泡(“UMV”)，或具有一系列脂質雙層的多層囊泡(“MLV”)(也稱為”寡層囊泡”)。多層囊泡的直徑通常在0.2μm至10μm的尺寸范圍內。參見例如WO 98/006882。盡管在制劑中通常采用抗溶血措施，但由于脂質體與賦形劑的不相容性或脂質體在制劑中的不穩定性，在制劑中保持足夠量的脂質體可能不是可行的。此外，重構含有疏水性藥物的凍干制劑通常是困難的。此外，脂質體在含有濃縮有機溶劑的制劑中不穩定。

直徑小于0.2μm(例如0.02-0.2μm)的單層囊泡通常稱為小單層囊泡(“SUV”)。直徑大于0.45μm(在一些情況下大于1μm)的單層囊泡通常稱為大單層囊泡(“LUV”)。

脂質體的(一或多層)雙層最通常包含磷脂，但也可包含脂質，包括但不限于脂肪酸、脂肪酸鹽和/或脂肪醇。除其他因素外，脂質體的特性取決于組成的性質。因此，如果要獲得具有某些特征的脂質體，則必須考慮其極性基團的電荷和/或其脂肪酸鏈的長度和飽和度。

此外，脂質體的特性可以被修飾，例如，將膽固醇和其他脂質摻入膜中、改變脂質雙層的數量、或將天然分子(例如蛋白質、多糖、糖脂、抗體、酶)或合成分子(例如polyethylglycol)共價連接到表面。任選地，存在多種磷脂與其他脂質或膽固醇的組合，以在水性介質中獲得脂質體。取決于制備方法和所用的脂質，可以獲得不同尺寸、結構和特性的囊泡。

關于脂質體形成所考慮的另一個重要參數是脂質雙層的剛性。形成部分雙層的水合脂質可以是液晶(流體)狀態或凝膠狀態。隨著溫度升高，凝膠狀態轉變為液晶狀態。這發生在稱為相變溫度(Tc)的溫度，其對每種脂質是特異性的。Tc與鏈長成正比，與脂肪酸的不飽和度成反比，并取決于極性基團的性質。

盡管如此，制備脂質囊泡(例如脂質體)的常用方法包含蒸發有機溶劑，其中脂質溶解在有機溶劑中然后分散在任選的緩沖水性溶液中。一種示例性方法，稱為Bangham方法，最初描述于Bangham et al.,J.Hot.Biol.,11:238-252(1965)。本領域技術人員已知Bangham方法的變形，其中一些在下面描述。

薄脂質層的水合。從雙層的組成脂質的有機溶液開始，通過除去有機溶劑制備脂質膜，這可以通過蒸發(例如在旋轉蒸發器中減壓)或通過凍干法來實現。通過加入水性溶液并在高于Tc的溫度攪拌混合物，使所得到的干燥脂質膜水合。

反相蒸發。從雙層的組成脂質的有機溶液開始，通過除去有機溶劑制備脂質膜。用氮氣凈化該系統，并將脂質再溶解在通常由乙醚和/或異丙醚構成的第二有機溶液中。將水相加入再溶解的脂質中。該系統保持在連續的氮氣下。通過除去第二有機溶劑形成凝膠。