[發(fā)明專利]水凝膠前體制劑及其用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201780045912.2
• 申請日: 2017-07-20
• 公開（公告）號: CN109642207A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: S·里茲;J·圖阿蒂
• 申請（專利權(quán)）人: Q吉爾股份有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 北京泛華偉業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅;李渤

1.一種未反應(yīng)的粉末形式的水凝膠前體制劑，其包含：

-活化酶，優(yōu)選凝血酶，

-交聯(lián)酶，優(yōu)選轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，更優(yōu)選因子XIII轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，其中所述交聯(lián)酶在含有或不含緩沖劑的水中可被所述活化酶活化，優(yōu)選在含有或不含緩沖劑的電導(dǎo)率＜5μS/cm的水中可被所述活化酶活化，和/或在pH優(yōu)選為5至8，更優(yōu)選為6至8，最優(yōu)選為6.5至8的水中可被所述活化酶活化，

-至少一種結(jié)構(gòu)化合物A，優(yōu)選兩種不同的結(jié)構(gòu)化合物A和B，

其中所述結(jié)構(gòu)化合物可通過所述交聯(lián)酶介導(dǎo)的選擇性反應(yīng)交聯(lián)以形成水凝膠，其中所述交聯(lián)酶優(yōu)選以50至100％，優(yōu)選75至100％，更優(yōu)選基本上100％的活化度被活化。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水凝膠前體制劑，其中所述前體制劑基本上不含二價離子，優(yōu)選基本上不含鈣離子，其中所述二價離子濃度優(yōu)選<10μΜ，更優(yōu)選<1μΜ，最優(yōu)選<10ppm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2中任一項所述的水凝膠前體制劑，其中所述至少一種結(jié)構(gòu)化合物包含至少兩種不同的反應(yīng)性基團。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的水凝膠前體制劑，其中所述至少一種結(jié)構(gòu)化合物包含?；糠?，優(yōu)選兩個酰基部分，和胺部分，優(yōu)選兩個胺部分。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的水凝膠前體制劑，其中所述水凝膠前體制劑包含至少一種另外的水凝膠化合物，優(yōu)選至少一種可交聯(lián)的生物活性化合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的水凝膠前體制劑，其中所述結(jié)構(gòu)化合物為多支化聚乙二醇，優(yōu)選8臂聚乙二醇。

7.一種用于制備未反應(yīng)的粉末形式的水凝膠前體制劑的方法，優(yōu)選地，一種用于制備根據(jù)權(quán)利要求1至6所述的未反應(yīng)的粉末形式的水凝膠前體制劑的方法，其包括以下步驟：

a)在含有或不含緩沖劑的水中，優(yōu)選在含有或不含緩沖劑的電導(dǎo)率＜5μS/cm的水中，和/或在pH優(yōu)選為5至8，更優(yōu)選6至8，最優(yōu)選6.5至8的水中混合：

-活化酶，優(yōu)選凝血酶，

-交聯(lián)酶，優(yōu)選轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，更優(yōu)選因子XIII轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，其中所述交聯(lián)酶在水中可被所述活化酶活化，

-至少一種結(jié)構(gòu)化合物A，優(yōu)選兩種不同的結(jié)構(gòu)化合物A和B，

b)在步驟a)之前或之后孵育所述交聯(lián)酶和活化酶足夠的時間，使得凝膠特性獨立于制備時間的持續(xù)時間而保持基本恒定；

c)任選地在步驟a)或b)之后冷凍干燥所述混合物，

其中所述結(jié)構(gòu)化合物可通過所述交聯(lián)酶介導(dǎo)的選擇性反應(yīng)交聯(lián)，并且其中在a)中在阻礙所述交聯(lián)酶介導(dǎo)的交聯(lián)反應(yīng)的條件下混合所述組分。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中在4至37℃，優(yōu)選10至25℃的溫度下，更優(yōu)選在室溫下，對a)中獲得的混合物的孵育至少0.5小時，優(yōu)選小于24小時，優(yōu)選2至4小時。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其中在步驟b)之后，所述交聯(lián)酶具有50至100％，優(yōu)選75至100％，更優(yōu)選基本上100％的活化度。

10.根據(jù)權(quán)利要求7至9中任一項所述的方法，其中在步驟a)中添加至少一種另外的水凝膠化合物，優(yōu)選至少一種可交聯(lián)的生物活性化合物。

11.一種水凝膠前體制劑，其可通過根據(jù)權(quán)利要求7至10中任一項所述的方法獲得或通過根據(jù)權(quán)利要求7至10中任一項所述的方法獲得。

12.一種試劑盒，其包括至少一個填充有如權(quán)利要求1至6中任一項所述的水凝膠前體制劑的容器、具有反應(yīng)緩沖液的容器，并且任選的使用說明書。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試劑盒，其中所述反應(yīng)緩沖液包含在1至200mM，優(yōu)選10至100mM，更優(yōu)選20至100mM范圍內(nèi)的鈣離子。