[發(fā)明專利]CD4CD8雙陽性T細胞的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201780039329.0
• 申請日: 2017-06-21
• 公開（公告）號: CN109415699A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設計）人: 金子新;安井裕;入口翔一;上田樹
• 申請（專利權）人: 國立大學法人京都大學
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/0735;C12N5/074;C12N5/10
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種制備CD4CD8雙陽性T細胞的方法，其包括在含有p38抑制劑和/或SDF-1的培養(yǎng)液中培養(yǎng)造血祖細胞，誘導CD4CD8雙陽性T細胞的步驟。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述培養(yǎng)液含有p38抑制劑和SDF-1。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述p38抑制劑為SB203580。

4.根據權利要求1～3中任一項所述的方法，其中，在所述步驟中，培養(yǎng)液含有維生素C類。

5.根據權利要求1～4中任一項所述的方法，其中，所述步驟利用貼壁培養(yǎng)進行。

6.根據權利要求1～5中任一項所述的方法，其中，所述造血祖細胞的培養(yǎng)不使用飼養(yǎng)細胞。

7.根據權利要求1～6中任一項所述的方法，其中，所述造血祖細胞是從多能性干細胞分化誘導而成的造血祖細胞。

8.根據權利要求7所述的方法，其中，多能性干細胞為人工多能性干細胞。

9.根據權利要求8所述的方法，其中，人工多能性干細胞來自T細胞以外的體細胞。

10.根據權利要求8或9所述的方法，其中，人工多能性干細胞為導入了嵌合抗原受體的人工多能性干細胞。

11.一種制備CD4CD8雙陽性T細胞的方法，其包括以下步驟：

(1)在培養(yǎng)液中培養(yǎng)多能性干細胞，誘導造血祖細胞的步驟；

(2)在含有p38抑制劑和/或SDF-1的培養(yǎng)液中培養(yǎng)所述步驟(1)中得到的造血祖細胞，誘導CD4CD8雙陽性T細胞的步驟。

12.根據權利要求11所述的方法，其中，在所述步驟(2)中，培養(yǎng)液含有p38抑制劑和SDF-1。

13.根據權利要求11或12所述的方法，其中，所述p38抑制劑為SB203580。

14.根據權利要求11～13中任一項所述的方法，其中，所述步驟(1)利用懸浮培養(yǎng)進行。

15.根據權利要求11～14中任一項所述的方法，其中，所述步驟(2)利用貼壁培養(yǎng)進行。

16.根據權利要求11～15中任一項所述的方法，其中，在所述步驟(1)和(2)中，培養(yǎng)液含有維生素C類。

17.根據權利要求11～16中任一項所述的方法，其中，在所述步驟(1)和(2)中，培養(yǎng)不使用飼養(yǎng)細胞。

18.根據權利要求11～17中任一項所述的方法，其中，多能性干細胞為人工多能性干細胞。

19.根據權利要求18所述的方法，其中，人工多能性干細胞來自T細胞以外的體細胞。

20.根據權利要求18或19所述的方法，其中，人工多能性干細胞為導入了嵌合抗原受體的人工多能性干細胞。

21.一種制備CD8陽性T細胞的方法，其包括：

利用權利要求1～20中任一項所述的方法制備CD4CD8雙陽性T細胞的步驟、以及將所得到的CD4CD8雙陽性T細胞在添加了腎上腺皮質激素劑的培養(yǎng)液中培養(yǎng)而得到CD8陽性T細胞的步驟。

22.細胞制劑，其包含通過權利要求1～20中任一項所述的方法得到的CD4CD8雙陽性T細胞和/或通過權利要求21的方法得到的CD8陽性T細胞。