[發明專利]治療在GLA基因中具有G9331A突變的患者的法布里病的方法

在審

• 申請號: 201780028175.5
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN109069494A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 埃爾弗里達·本杰明
• 申請（專利權）人: 阿米庫斯治療學公司
• 主分類號: A61K31/445
• 分類號: A61K31/445;A61P3/00
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 徐金國;吳啟超

提供了治療診斷患有法布里病的患者的方法和在診斷患有或疑似患有法布里病的患者中增強α?半乳糖苷酶A的方法。某些方法包括向患者給予治療有效劑量的α?半乳糖苷酶A的藥理學伴侶，其中該患者在編碼α?半乳糖苷酶A的核酸序列的內含子4中具有剪接位點突變。還描述了藥理學伴侶用于治療法布里病的用途和用于治療法布里病的組合物。

技術領域

本發明的原理和實施例總體上涉及藥理學伴侶用于治療法布里病的用途，特別是在GLA基因的內含子4中具有剪接位點突變的患者中。

背景技術

許多人類疾病由導致蛋白質氨基酸序列變化的突變引起，這些變化降低蛋白質穩定性并可阻止其正確折疊。蛋白質通常在稱為內質網或ER的細胞的特定區域折疊。細胞具有質量控制機制，其確保蛋白質在它們可以從ER移動到細胞中的合適目的地之前被折疊成它們正確的三維形狀，這一過程通常被稱為蛋白質運輸。錯誤折疊的蛋白質通常在最初保留在ER中后通過質量控制機制消除。在某些情況下，錯誤折疊的蛋白質可以在被消除之前累積在ER中。錯誤折疊的蛋白質在ER中的保留打斷了它們的正確運輸，并且所得的降低的生物活性可導致細胞功能受損并最終導致疾病。另外，錯誤折疊的蛋白質在ER中的積累可能導致對細胞的各種類型的壓力，這也可能有助于細胞的功能障礙和疾病。

導致產生不太穩定或錯誤折疊的蛋白質的大多數遺傳突變被稱為錯義突變。這些突變導致蛋白質中單個氨基酸被另一個氨基酸取代。然而，除了錯義突變之外，還存在可導致具有降低的生物活性的蛋白質的其他類型的突變。可引起疾病的另一種類型的突變是剪接位點突變。剪接位點突變是如下突變，其中在內含子剪接發生位點處有核苷酸的插入、缺失或數量改變。這種突變可導致mRNA前體的不正確加工，包括在隱蔽剪接點處的外顯子跳躍或剪接，導致總的結構和功能改變。

此類突變可導致溶酶體貯積病(LSD)，其特征在于由于編碼溶酶體酶的基因突變導致的溶酶體酶的缺陷。這導致那些酶的底物的病理積累，這些底物包括脂質、碳水化合物和多糖。盡管有與每個LSD相關的許多不同的突變基因型，但是許多突變是錯義突變，其可導致產生較不穩定的酶。這些較不穩定的酶有時通過ER相關的降解途徑過早降解。這導致溶酶體中的酶缺陷以及底物的病理積累。此類突變酶有時在相關領域中被稱為“折疊突變體”或“構象突變體”。

法布里病是由編碼α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)的GLA基因的突變引起的LSD。突變導致底物球形三酰神經酰胺(Gb3，GL-3或神經酰胺三己糖苷)積累在各種組織和器官中。患有法布里病的男性是半合子，因為這些疾病基因在X染色體上編碼。法布里病估計會影響40,000和60,000名男性中的1名，并且女性發生率較低。已經有幾種治療法布里病的途徑。

用于治療法布里病的一種批準的療法是酶替代療法(ERT)，其典型地涉及靜脈內輸注純化形式的相應野生型蛋白質(基因酶公司(Genzyme Corp.))。酶替代療法的主要難題之一是達到并維持治療有效量的體內蛋白，這歸因于輸注的蛋白的快速降解。目前克服這個問題的方法是執行許多昂貴的高劑量輸注。ERT還有一些額外的警告，例如大量生成、純化和存儲正確折疊蛋白質的困難；獲得糖基化天然蛋白；產生抗蛋白免疫應答；并且蛋白質不能穿過血腦屏障緩解中樞神經系統病理(即，低生物利用度)。此外，替代酶不能以足夠的量滲透心臟或腎臟，以減少腎足細胞或心肌細胞中的底物積累，這在法布里病理學中表現突出。

使用含有編碼功能性蛋白質的核酸序列的重組載體或使用表達功能性蛋白質的遺傳修飾的人細胞進行的基因療法也正在開發中，以治療從蛋白質替代中受益的蛋白質缺陷癥和其他病癥。

治療一些酶缺陷的第三種途徑涉及使用小分子抑制劑來減少缺陷酶蛋白質的天然底物的產生，從而改善病理學。這種“底物還原”途徑已被具體描述，其針對一類約40種相關的酶障礙，稱為溶酶體貯積病，包括鞘糖脂貯積病。提出用作治療的小分子抑制劑特異性地抑制參與糖脂合成的酶，減少需要由缺陷酶分解的細胞糖脂的量。