[發明專利]標靶醫療性溶酶體酵素融合蛋白質、其相關調配物與用途

在審

• 申請號: 201780025534.1
• 申請日: 2017-02-24
• 公開（公告）號: CN109069595A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: S·莫沙沙埃埃;J·K·平克斯塔夫;A·沙伊夫威特茲;N·恰喬
• 申請（專利權）人: 生物馬林藥物股份有限公司
• 主分類號: A61K38/47
• 分類號: A61K38/47;C07K14/65;A61P25/28
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

本申請一般是有關一種適用于治療溶酶體貯積癥的醫療性溶酶體酵素融合蛋白質、包含此等融合蛋白質的液體調配物、及適用于治療哺乳動物的溶酶體貯積癥的相關方法。

技術領域

本申請一般是有關一種適用于治療溶酶體貯積癥的醫療性溶酶體酵素融合蛋白質、包含此等融合蛋白質的液體調配物、及治療哺乳動物的溶酶體貯積癥的相關方法。

背景技術

通常，哺乳動物溶酶體酵素是于細胞質液中合成，并穿越ER，在此與N所連接的高甘露糖型碳水化合物進行糖基化。在高基氏體中，在溶酶體酵素上通過添加甘露糖-6-磷酸(M6P)來修飾高甘露糖碳水化合物，而使此等蛋白質靶向溶酶體。經M6P-修飾的酵素隨后經由與兩種M6P受體其中的一或二者交互作用而傳遞至溶酶體。

溶酶體中缺乏一或多種溶酶體酵素時，會直接或間接引發超過40種溶酶體貯積癥(LSD)。因此積極探討LSD的酵素置換療法。該療法通常需要吸收LSD蛋白質并以依賴M6P的方式傳遞至各種不同細胞型態的溶酶體中。其中一種可能方法涉及純化LSD蛋白質，并使用M6P修飾來納入碳水化合物部分體。經過這種修飾的物質可能比未經修飾的LSD蛋白質更有效被細胞吸收，因為其會與細胞表面上的M6P受體交互作用。

過去曾發展可以更有效傳遞醫療性酵素至溶酶體的以肽為主的標靶技術。此專有技術稱為不依賴糖基化的靶向溶酶體技術(Glycosylation Independent LysosomalTargeting)(GILT)，因為由與醫療性酵素連接的肽標記置換M6P，作為使該蛋白質靶向溶酶體的部分體。GILT技術的詳細內容說明于美國申請公告案案號2003-0082176、2004-0006008、2003-0072761、2005-0281805、2005-0244400，美國專利案案號8,492,337與8,563,691，及國際公告案WO 03/032913、WO 03/032727、WO 02/087510、WO 03/102583、WO2005/078077、WO 2009/137721與WO 2014/085621，其等揭示內容均以引用方式并入本文中。

發明內容

本申請進一步提供基于GILT技術，使醫療性融合蛋白質有效靶向溶酶體的改良組成物、調配物與方法。本申請特別提供一種使用靶向溶酶體的肽，使醫療性溶酶體酵素靶向溶酶體，供治療溶酶體貯積癥的方法與組成物。本申請亦提供一種利用靶向溶酶體的肽，使溶酶體酵素靶向溶酶體的方法與組成物，該肽已降低或消除對IGF-I受體的結合親和性，及/或降低或消除對胰島素受體的結合親和性，及/或抵抗弗林蛋白酶(furin)裂解。本申請亦提供標靶溶酶體酵素融合蛋白質，其包含溶酶體酵素與IGF-II及間隔肽，其可以改善溶酶體酵素融合蛋白質的制造及被溶酶體吸收。適用于納入本申請醫療性融合蛋白質中的溶酶體酵素實例及使用這些融合蛋白質治療的疾病示于下表1。某些優選實施例中，溶酶體酵素為一種成熟人類α-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(Naglu)酵素，且溶酶體貯積癥是IIIB型粘多醣癥(MPS IIIB；圣菲利柏氏癥B型(Sanfilippo B Syndrome))。

一項方面中，本申請醫療性融合蛋白質包含功能性α-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶酵素，其具有可檢測的酵素活性，且具有的氨基酸序列是與如圖1所示成熟人類Naglu蛋白質的氨基酸序列(SEQ ID NO：1)具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性。另一方面中，本申請是有關一種如圖1所示成熟人類Naglu蛋白質(SEQ ID NO：1)的片段，其保留可檢測的Naglu酵素活性。

另一方面中，本申請醫療性融合蛋白質包含肽標記，其具有的氨基酸序列是與成熟人類IGF-II的氨基酸8-67的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性。基于此，成熟人類IGF-II的氨基酸8-67具有下列氨基酸序列：LCGGELVDTLQFVCGDRGFYFSRPASRVSRRSRGIVEECCFRSCDLALLETYCATPAKSE(SEQ IDNO：2)。