[發明專利]一種利用紫外分光光度法測定殼聚糖酸水解率的方法

在審

• 申請號: 201711500093.4
• 申請日: 2017-12-30
• 公開（公告）號: CN108254328A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發明（設計）人: 白研;蘇政權;毋福海
• 申請（專利權）人: 廣東藥科大學
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 廣州勝沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 孫文卉

1.一種利用紫外分光光度法測定殼聚糖酸水解率的方法，其包括下述步驟：

1)稱取300mg殼聚糖加入燒瓶，量取40ml無機酸溶液加入燒瓶，密封裝置，用真空泵抽盡空氣，再通入氮氣，重復3次；啟動恒溫磁力攪拌器，控制反應溫度100℃、轉速200r/min，反應時間為24h～48h，用取樣針分別在不同時間取出適量水解液分別密封保存，作為樣品，放置冰箱備用；

2)紫外分光光度法測定氨基葡萄糖的含量：

a)繪制A和不同濃度的氨基葡萄糖標準液的標準曲線：分別吸取1.5mL一定濃度梯度的氨基葡萄糖標準液于10mL比色管中用水定容至2mL，分別加入乙酰丙酮溶液1.5mL，搖勻，80℃水浴30min；取下冷卻至室溫，分別加對二甲氨基苯甲醛溶液5.0mL，加無水乙醇至10mL，60℃水浴60min，取下冷卻至室溫，以空白管作對照，在紫外分光光度計上測定波長534nm時吸光值；分別做三組平行試驗，測各管吸光度；以測得吸光度A為縱坐標，氨基葡萄糖含量為橫坐標，繪制標準曲線；

b)樣品工作液的制備：取步驟1)中水解液樣品1.0mL于50mL容量瓶，用水定容至50mL后充分搖勻，即得樣品工作液；

C)樣品中氨基葡萄糖的含量確定：取步驟b)中樣品工作液1mL，按步驟a)檢測方法進行測定，在534nm處測定其吸光度值A，將A代入線性回歸方程求得樣品中氨基葡萄糖的含量；

3)殼聚糖水解液中氨基葡萄糖產率的計算公式為：

式中：m₁是由標準曲線計算得出鹽酸氨基葡萄糖的含量，單位是μg/mL；m₂是殼聚糖樣品的含量，單位是μg/mL；0.8309是鹽酸氨基葡萄糖折算為氨基葡萄糖的系數。

2.根據權利要求1所述的一種利用紫外分光光度法測定殼聚糖酸水解率的方法，其特征在于，所述殼聚糖的脫乙酰度為80％以上；殼聚糖的分子量范圍在2萬～30萬。

3.根據權利要求1所述的一種利用紫外分光光度法測定殼聚糖酸水解率的方法，其特征在于，所述無機酸是鹽酸，磷酸和硫酸中的一種或兩種以上。

4.根據權利要求1所述的一種利用紫外分光光度法測定殼聚糖酸水解率的方法，其特征在于，所述無機酸是濃度為6mol/L的鹽酸。

5.根據權利要求1所述的一種利用紫外分光光度法測定殼聚糖酸水解率的方法，其特征在于，步驟a)中氨基葡萄糖的含量范圍是3μg/mL～24μg/mL。