[發(fā)明專利]一種墨旱蓮藥材的HPLC指紋圖譜建立方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711490963.4
• 申請日: 2017-12-30
• 公開（公告）號: CN109991347B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 不公告發(fā)明人
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州唐錕辰新能源科技有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開一種墨旱蓮藥材指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜，涉及中藥材的指紋圖譜技術(shù)領(lǐng)域，該方法包括對照品溶液的制備、供試品的制備和高效液相色譜檢測條件，取墨旱蓮藥材粉末精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入85%乙醇50ml，加熱回流1.5小時，放冷，搖勻，濾液蒸干,加水約50 m l，加乙酸乙酯萃取3次,每次約50 ml,合并乙酸乙酯層,蒸干,殘渣加甲醇定容至10 ml,采用0.45μm的微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液；對供試品溶液進行高效液相色譜檢測，色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相為甲醇?乙腈?0.3%甲酸；進樣量為5?15μl；采用梯度洗脫方式，檢測波長為340nm，流速為0.8mL/min，柱溫為35℃，得到墨旱蓮藥材指紋圖譜，本發(fā)明建立的墨旱蓮藥材指紋圖譜可有效的監(jiān)控墨旱蓮藥材的質(zhì)量及鑒別其真?zhèn)巍?/p>

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥質(zhì)量分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種墨旱蓮藥材的高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜方法進行墨旱蓮藥材的質(zhì)量鑒別和控制。

背景技術(shù)

墨旱蓮，系為菊科植物鱧腸的干燥地上部分，花開時采割，曬干。墨旱蓮臨床應(yīng)用多為飲片，主治滋補肝腎，涼血止血。用于肝腎陰虛，牙齒松動，須發(fā)早白，眩暈耳鳴，腰膝酸軟，陰虛血熱吐血、衄血、尿血，血痢，崩漏下血，外傷出血。目前墨旱蓮的質(zhì)量控制方法采用的是單一物質(zhì)的含量鑒別，但是墨旱蓮因品種、產(chǎn)地的不同，其有效成分的含量存在一定的差異，僅憑單一成分的含量測定已明顯不能滿足于其質(zhì)量控制，故用于臨床的質(zhì)量穩(wěn)定性也難以保證。中藥指紋圖譜技術(shù)是符合中醫(yī)理論及現(xiàn)狀的較好的質(zhì)量控制技術(shù)，因為它并不需要詳細了解藥物的具體活性成份信息，只需要了解個別指標性活性組分信息，以指標性成份峰作為標記，結(jié)合非指標成份進行比對，用來綜合評價藥物質(zhì)量，既符合中醫(yī)藥理論的整體觀點，也滿足了對中藥質(zhì)量的可控、保證其療效的要求。墨旱蓮作為一種常用藥，其質(zhì)量控制的研究報道較少，本發(fā)明提出了一種墨旱蓮藥材的指紋圖譜鑒別方法，能夠從整體把握墨旱蓮的質(zhì)量情況，為墨旱蓮的質(zhì)量控制和真?zhèn)舞b別提供了一種有效的技術(shù)手段。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是為提供一種墨旱蓮藥材提取物的制備方法，并通過HPLC指紋圖譜的方法對其進行質(zhì)量鑒別和控制。

包括如下步驟：

1）對照品溶液的制備：取蟛蜞菊內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每l m l含17μg的溶液，即得。

2）供試品溶液的制備：選擇不同產(chǎn)地7個樣品，分別取粉末（過5號篩）約 2-5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入85 % 乙 醇 50ml，加熱回流1.5小時，放冷，搖勻，濾液蒸干, 加水約 50 ml，加乙酸乙酯萃取3次, 每次約50 ml, 合并乙酸乙酯層 ,蒸干, 殘渣加甲醇定容至10 ml ,采用0. 45 μ m的微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

3）測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-15μl，注入液相色譜儀，測定，色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以乙腈為流動相B，以0. 3 %甲酸溶液為流動相C，進行梯度洗脫；流速:0.8 mL·min^-1; 柱溫: 35 ℃; 進樣量 :5-15 μl；檢測波長為340nm。理論板數(shù)按蟛蜞菊內(nèi)酯峰計算應(yīng)不低于4000。梯度洗脫程序為：