[發明專利]一種墨旱蓮藥材的HPLC指紋圖譜建立方法

有效

• 申請號: 201711490963.4
• 申請日: 2017-12-30
• 公開（公告）號: CN109991347B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 蘇州唐錕辰新能源科技有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種墨旱蓮藥材的HPLC指紋圖譜建立方法,其特征在于包括如下步驟：

1）對照品溶液的制備： 取蟛蜞菊內酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含17μg的溶液，即得；

2）供試品溶液的制備： 選擇不同產地7個樣品，分別取過5號篩的粉末2-5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入85%乙醇50ml，加熱回流1.5小時，放冷，搖勻，濾液蒸干,加水約50mL，加乙酸乙酯萃取3次,每次約50mL,合并乙酸乙酯層,蒸干,殘渣加甲醇定容至10mL,采用0.45μm的微孔濾膜過濾，取續濾液，即得；

3）測定法： 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-15μ1，注入液相色譜儀，測定，色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以乙腈為流動相B，以0.3%甲酸溶液為流動相C，進行梯度洗脫；流速:0.8mL·min-1;柱溫:35℃;進樣量:5-15μL；檢測波長為340nm；理論板數按蟛蜞菊內酯峰計算應不低于4000；梯度洗脫程序為：

時間(分鐘）流動相A(%)流動相B(%)流動相C(%)

0 5 10 85

15 15 10 75

35 25 15 60

60 60 15 25

75 70 15 15

80 70 20 10

根據7批不同產地的藥材HPLC指紋圖譜結果,利用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件”生成藥材共有模式的對照HPLC指紋圖譜,得27個共有特征峰，依次標記，共有峰的相對保留時間為：0.120（峰1）、0.263（峰2）、0.367（峰3）、0.466（峰4）、0.500（峰5）、0.589（峰6）、0.706（峰7）、0.741（峰8）、0.783（峰9）、0.827（峰10）、0.840（峰11）、1（峰12，S）、1.052（峰13）、1.092（峰14）、1.120（峰15）、1.142（峰16）、1.300（峰17）、1.556（峰18）、1.593（峰19）、1.642（峰20）、1.670（峰21）、1.735（峰22）、1.860（峰23）、1.993（峰24）、2.072（峰25）、2.199（峰26）、2.250（峰27）。