[發明專利]一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法

有效

• 申請號: 201711488198.2
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN107884502B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 王義;張鵬;金昌福;李寧飛
• 申請（專利權）人: 寧夏希望田野生物農業科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 賈澤純

一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，它涉及一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，該方法包括對照品溶液的制備、供試品溶液的制備，之后采用超高效液相色譜串聯質譜法以梯度洗脫的方式將上述標準品溶液和供試品溶液注入儀器中，根據內標法計算阿維菌素殘留。本發明通過對色譜和質譜條件的優選及供試品、標準品制備方法的試驗，建立了土壤中阿維菌素的超高效液相色譜串聯質譜檢測分析方法；通過對色譜以及質譜條件的優化，建立了土壤中阿維菌素的檢測方法，通過方法學驗證試驗研究表明：所建立的方法準確度高、專屬性強、重現性良好，能有效檢測土壤中阿維菌素殘留量。

技術領域

本發明涉及土壤的檢測檢驗技術領域，特別是涉及一種土壤中阿維菌素殘留的檢測方法。

背景技術

在我國，農業及畜牧業的規模越來越大，為了促進植物生長以及防病治病，農用抗生素使用量也隨之增加，由此而產生的抗生素濫用問題愈發嚴重。農用抗生素的最終環境歸宿為土壤，多數農藥進入環境后并沒有發揮應有的藥效而是直接進入土壤及水體中，針對土壤環境，其殘留對土壤動物、微生物及土壤酶活性產生影響，破壞生態環境，經食物鏈作用也可能進入人體。農用抗生素作為一種新的環境污染物所引起的危害不容忽視，必須高度重視。建立土壤中不同種類抗生素的痕量檢測分析方法成為比較熱門的探索方向。但土壤中的抗生素主要是對于四環素類抗生素的分析檢測，阿維菌素的檢測報道比較少見，且土壤基質不同提取和凈化條件的選擇也有所不同。

我國主要應用發酵法來生產阿維菌素，自八十年代引入了阿維菌素鏈霉菌，對其工藝的菌株培育、提取、發酵、純化等各個步驟都有深入創新研究，并在農畜業及醫療方面得到了廣泛的應用。現在，我國已成為阿維菌素唯一生產國，全部替代進口，中國企業已成立阿維菌素產業聯盟，并已擁有上市公司。年產值達30億。2013年，總產能達5500t左右。

由于阿維菌素殘留在土壤中會威脅到生態平衡，故為了研究阿維菌素菌渣有機肥在土壤中環境行為、穩定性及衰減規律，必須首先建立土壤中阿維菌素殘留的檢測方法。由于基質效應的影響及檢測限的要求，故不同于菌渣已建立的方法，需要重新建立在土壤中目標物質殘留的檢測方法。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有技術存在檢測限較高、不靈敏；沒有一種有效解決基質效應的影響，且現有技術無法快速/準確檢測土壤中阿維菌素殘留量的問題，而提供了一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法。

本發明的一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，它是按照以下步驟進行的：

一、供試品樣品制備：

1)稱取含有阿維菌素的土壤，加入甲氨基阿維菌素苯甲基鹽、乙腈和去離子水，渦旋均質45～60s，超聲輔助提取18～20min，而后置于離心機內，以3500～4000r/min離心8～10min，收集上清液，將收集的沉淀保存備用；

2)向上一步收集的沉淀中，加入甲氨基阿維菌素苯甲基鹽、乙腈和去離子水，渦旋均質45～60s，超聲輔助提取18～20min，而后置于離心機內，以3500～4000r/min離心8～10min，收集上清液；

3)將步驟1)和步驟2)收集的上清液合并后，定容，得待浸化樣品；

4)取乙腈和活化液對HLB固相萃取柱進行活化，加入待浸化樣品，以0.5～1.5mL/min流速過柱，待樣液全部流出，用淋洗劑正己烷進行淋洗，用洗脫液洗脫待分析物，抽干所有的液體并收集，用氮吹儀吹近干，并加甲醇復溶，均質45～60s，過0.22μm濾膜后，得供試品溶液；

二、標準曲線繪制：