[發明專利]一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法

有效

• 申請號: 201711488198.2
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN107884502B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 王義;張鵬;金昌福;李寧飛
• 申請（專利權）人: 寧夏希望田野生物農業科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 賈澤純

1.一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，其特征在于它是按照以下步驟進行的：

一、供試品樣品制備：

1)稱取含有阿維菌素的土壤，加入甲氨基阿維菌素苯甲基鹽、乙腈和去離子水，渦旋均質45～60s，超聲輔助提取18～20min，而后置于離心機內，以3500～4000r/min離心8～10min，收集上清液，將收集的沉淀保存備用；

2)向上一步收集的沉淀中，加入甲氨基阿維菌素苯甲基鹽、乙腈和去離子水，渦旋均質45～60s，超聲輔助提取18～20min，而后置于離心機內，以3500～4000r/min離心8～10min，收集上清液；

3)將步驟1)和步驟2)收集的上清液合并后，定容，得待浸化樣品；

4)取乙腈和活化液對HLB固相萃取柱進行活化，加入待浸化樣品，以0.5～1.5mL/min流速過柱，待樣液全部流出，用淋洗劑正己烷進行淋洗，用洗脫液洗脫待分析物，抽干所有的液體并收集，用氮吹儀吹近干，并加甲醇復溶，均質45～60s，過0.22μm濾膜后，得供試品溶液；

二、標準曲線繪制：

取阿維菌素標準貯備液，用甲醇稀釋，配制成濃度梯度為1～1000μg/L的標準工作溶液，每一個梯度的標準工作溶液內都含有1μg/L的甲維鹽，使用超高效液相色譜-串聯四級桿質譜儀進行檢測；以阿維菌素峰面積與甲維鹽峰面積比值作為縱坐標，以從1～1000μg/L的標準工作溶液中隨機選取的標準工作溶液濃度作為橫坐標，繪制標準曲線，求回歸方程和相關系數；

三、測定：吸取上述標準工作品溶液和供試品溶液注入超高效液相色譜-串聯四級桿質譜儀中，根據內標法計算阿維菌素殘留量；

色譜條件：色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱，色譜柱內徑為2.1mm，柱長50mm，填料顆粒直徑為1.7μm，柱溫：40℃；流速：0.3mL/min；進樣量12μL；流動相A1為有機相:色譜純甲醇，流動相B1為無機相：含10mM氨的水溶液并用甲酸調pH至4，洗脫條件如下：

0～2min，75％A₁+25％B₁；

2～2.1min，由75％A₁+25％B₁調節為85％A₁+15％B₁；

2.1min～5min，85％A₁+15％B₁；

5～5.1min，由85％A₁+15％B₁調節為75％A₁+25％B₁；

5.1～6min，75％A₁+25％B₁；其中，A₁為有機相，B₁為無機相；

質譜條件：

ESI電噴霧離子源；

正離子掃描模式；

采集方式：MRM；

離子源內毛細管電壓：4kV；

錐孔電壓：45V；

去溶劑氣溫度：400℃；

離子源溫度：150℃；

脫溶劑氣流量：900L/Hr；

錐孔氣流量：60L/hr；活化液為乙腈與水按體積比為2:3的比例混合而成；洗脫液為甲醇與乙腈按體積比為1:1的比例混合而成。

2.根據權利要求1所述的一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，其特征在于沉淀、甲氨基阿維菌素苯甲基鹽、乙腈和去離子水的質量體積比為1g：0.001～0.003μg：7～9mL：1～3mL。

3.根據權利要求1或2所述的一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，其特征在于沉淀、甲氨基阿維菌素苯甲基鹽、乙腈和去離子水的質量體積比為1g：0.001μg：8mL：2mL。

4.根據權利要求1所述的一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，其特征在于乙腈與活化液的體積比為1:1。

5.根據權利要求1所述的一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，其特征在于步驟1)和2)中的渦旋均質時間均為50～60s，超聲輔助提取時間均為18～20min。

6.根據權利要求1所述的一種土壤中阿維菌素殘留量的檢測方法，其特征在于土壤中阿維菌素的含量為50～500μg/kg。