[發明專利]一種羅他夫辛片高效液相檢測方法

有效

• 申請號: 201711484549.2
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108152432B
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發明（設計）人: 張瑩瑩;吳濤;李小羿;戴向榮;殷雷;凌娟
• 申請（專利權）人: 兆科藥業（合肥）有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京東正專利代理事務所(普通合伙) 11312
• 代理人: 劉瑜冬

本發明公開了一種羅他夫辛片高效液相檢測方法，包括以下步驟：(1)制備對照品溶液：先用乙腈溶解羅他夫辛純度為98％標準品，再用pH6.8磷酸鹽緩沖液稀釋制成濃度為0.5～1.5μg/ml液體；(2)制備供試品溶液：將羅他夫辛片溶于pH6.8磷酸鹽緩沖液，恒溫，攪拌，過濾的供試品溶液；(3)采用高效液相色譜分別對供試品溶液和對照品溶液進行檢測，檢測條件為：色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相A：乙腈；流動相B：酸性水溶液；流速：0.5～1.0ml/min；檢測波長：205～230nm；柱溫：20～40℃。該方法理論塔板數高，有效地避免了組分干擾影響檢測結果的準確性，同時本方法檢測結果準確可靠、分析時間短、成本低、操作簡便等優點。

技術領域

本發明屬于分析化學領域，具體涉及一種羅他夫辛片高效液相檢測方法。

背景技術

羅他夫辛，Rostafuroxin是一種新型的ouabain拮抗劑—能夠通過拮抗ouabain對腎臟Na+-K+-ATP酶的作用而降低ouabain誘導的鹽依賴性高血壓患者的血壓。該藥物是特異作用在含有特異基因患者的基因表達蛋白上。可以有效的降低患者的血壓，而且降壓的效果，比普通的降壓藥物，效果顯著。

羅他夫辛是本實驗的研究對象，是羅他夫辛腸溶片的主藥，對羅他夫辛腸溶片溶出度的檢測可以指導我們制劑工藝的調整。

經查閱國內外相關文獻、專利，發現其檢測羅他夫辛含量的方法比較簡單，利用現有的技術檢測羅他夫辛腸溶片，色譜柱性能下降較快，分析成本高。因此有必要開發一種既能準確測定羅他夫辛含量又經濟實用的分析檢測方法。

羅他夫辛腸溶片主藥含量比例小，且腸衣層包衣較厚(原處方增重約30％)。采用原方法進行羅他夫辛腸溶片溶出曲線檢測時，多次進樣后，出現色譜柱污染，柱效下降，羅他夫辛主峰前后出現干擾現象，沖洗色譜柱24h后，柱效變化不大。原方法對色譜柱傷害較大，分析成本高。

本發明提供的羅他夫辛溶出檢測分析方法，不僅解決了上述色譜柱柱效下降問題，還明顯改善了羅他夫辛主峰峰型，峰高明顯變大，可使小規格藥物的溶出可以更準確的被檢出。

發明內容

羅他夫辛極微溶于水，微溶于二甲基亞砜(1％水溶液)，溶解于甲醇，略溶與乙腈和丙酮。羅他夫辛腸溶片是一種低規格的片劑，藥片本身主要由輔料構成。針對現有的羅他夫辛溶出分析方法，本發明提供了一種使用高效液相色譜儀檢測羅他夫辛釋放度的方法。該方法理論塔板數高，有效地避免了組分干擾影響檢測結果的準確性，同時本方法檢測結果準確可靠、分析時間短、成本低、操作簡便等優點。

一種羅他夫辛片高效液相檢測方法，包括以下步驟：

(1)制備對照品溶液：先用乙腈溶解羅他夫辛純度為98％的標準品，再用pH6.8磷酸鹽緩沖液稀釋制成濃度為0.5～1.5μg/ml液體；

(2)制備供試品溶液：將羅他夫辛片溶于pH6.8磷酸鹽緩沖液，37℃恒溫，攪拌，過濾的供試品溶液；

(3)采用高效液相色譜分別對供試品溶液和對照品溶液進行檢測，檢測條件為：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；

用于梯度洗脫流動相A：乙腈；

用于梯度洗脫流動相B：酸性水溶液；

流速：0.5～1.0ml/min；

檢測波長：205～230nm；

柱溫：20～40℃；

進行高效液相色譜分析，通過外標法以峰面積計算每片羅他夫辛片的溶出量，來測定羅他夫辛片中羅他夫辛的含量。

進一步優化，步驟2)所述攪拌轉速為40～60/min，攪拌時間為90～100min。