[發(fā)明專利]一種羅他夫辛片高效液相檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711484549.2
• 申請(qǐng)日: 2017-12-29
• 公開（公告）號(hào): CN108152432B
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張瑩瑩;吳濤;李小羿;戴向榮;殷雷;凌娟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 兆科藥業(yè)（合肥）有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京東正專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11312
• 代理人: 劉瑜冬

1.一種羅他夫辛片高效液相檢測(cè)方法，包括以下步驟：

(1)制備對(duì)照品溶液：先用乙腈溶解羅他夫辛純度為98％的標(biāo)準(zhǔn)品，再用pH6.8磷酸鹽緩沖液稀釋制成濃度為0.5～1.5μg/ml液體，得到對(duì)照品溶液；

(2)制備供試品溶液：將羅他夫辛片溶于pH6.8磷酸鹽緩沖液，37℃恒溫，攪拌，過濾得到供試品溶液；

(3)采用高效液相色譜分別對(duì)供試品溶液和對(duì)照品溶液進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)條件為：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；

用于梯度洗脫的流動(dòng)相A：乙腈；

用于梯度洗脫的流動(dòng)相B：酸性水溶液；

流速：0.5～1.0ml/min；

檢測(cè)波長(zhǎng)：205～230nm；

柱溫：20～40℃；

進(jìn)行高效液相色譜分析，通過外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片羅他夫辛片的溶出量，來測(cè)定羅他夫辛片中羅他夫辛的含量；

步驟3)所述流動(dòng)相采用階梯梯度洗脫，該洗脫方法為將流動(dòng)相分五個(gè)時(shí)間點(diǎn)注入色譜柱中進(jìn)行洗脫，時(shí)間點(diǎn)分別設(shè)為0.00分鐘、2.50～3.00分鐘、4.50～5.00分鐘、4.51～5.01分鐘和10.00分鐘；

步驟3)中所述的流動(dòng)相，五個(gè)時(shí)間點(diǎn)中有四個(gè)時(shí)間點(diǎn)的流動(dòng)相A與流動(dòng)相B體積比為30％:70％～40％：60％；第四個(gè)時(shí)間點(diǎn)流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比為80％：20％～95％：5％；

步驟3)流動(dòng)相B的酸性水溶液為磷酸水溶液、硼酸水溶液、或醋酸水溶液中的一種，該溶液濃度為0.01％～0.1％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述羅他夫辛片高效液相檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2)所述攪拌轉(zhuǎn)速為40～60/min，攪拌時(shí)間為80～100min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述羅他夫辛片高效液相檢測(cè)方法，其特征在于，步驟3)色譜柱的規(guī)格為內(nèi)徑4.6mm、柱長(zhǎng)150mm、粒徑5μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述羅他夫辛片高效液相檢測(cè)方法，其特征在于，步驟3)所述檢測(cè)方法，運(yùn)行時(shí)間≥10min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述羅他夫辛片高效液相檢測(cè)方法，其特征在于，步驟3)所述檢測(cè)方法，進(jìn)樣量為50μl。