[發明專利]一種超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法

在審

• 申請號: 201711484171.6
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108096290A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 陳乃富;谷仿麗;姜雪萍;陳乃東;韓邦興;張自紅
• 申請（專利權）人: 皖西學院
• 主分類號: A61K36/12
• 分類號: A61K36/12;A61P19/06;A61P9/00;A61P13/12
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙) 34124
• 代理人: 王志興

本發明涉及中藥有效成分提取領域，公開了一種超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，包括如下步驟：(1)新鮮蕨菜殺青、烘干、粉碎，過篩后得干粉；(2)蕨菜干粉放入三角燒瓶中，按比例加入乙醇，超聲功率280?320W條件下提取15?25min，提取2?4次，每次間隔14?16min；(3)冷卻至室溫，加入復合酶，再于50?55℃條件下浸提110?120min，過濾，收集濾液；(4)減壓濃縮至漿狀，冷凍干燥；(5)聚酰胺柱純化、冷凍干燥。本發明的優點在于：采用超聲輔助復合酶法提取技術，提取的蕨菜中黃酮含量9.0?9.2％，蘆丁含量0.95?1.2％，紫云英苷含量0.80?0.90％。

技術領域

本發明涉及中藥有效成分提取領域，尤其涉及一種超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法。

背景技術

尿酸是人類嘌呤代謝的終末產物，由次黃嘌呤、黃嘌呤在黃嘌呤氧化酶(XO)的作用下生成。由于人體內缺乏尿酸氧化酶，不能將其進一步分解成可溶性的尿囊素，而使人類極易形成高尿酸血癥。任何原因引起尿酸生成增多和(或)排泄減少均可導致高尿酸血癥。通常高尿酸血癥被認為是痛風的標志，據統計約有5％-12％的高尿酸血癥最終可發展為痛風。近年的研究表明，高尿酸血癥不僅是痛風最重要的生化基礎，而且與高血壓、高脂血癥、動脈粥樣硬化、肥胖、胰島素抵抗的發生密切相關，已成為威脅人類健康的嚴重代謝性疾病。

目前治療高尿酸血癥的藥物非常有限，主要依賴于XO抑制劑別嘌醇和促尿酸排泄藥丙磺舒、苯溴馬隆、非布司他和培格洛替酶等，但這些藥物毒副作用大，患者常常不能耐受，在一定程度上限制了其使用。因此，本實驗課題組前期研制出了一種以蕨菜黃酮作為唯一活性成分的抗高尿酸血癥藥物(申請號為201410089031.9的專利申請)，并公開了相應的蕨菜黃酮的提取方法“將新鮮蕨菜在溫度103℃條件下烘干，研成蕨菜粉末；用乙醚對蕨菜粉末進行脫脂，得到蕨菜干粉，加入3-5倍質量的體積分數為70-90％乙醇，回流提取1-3小時，提取3-5次，合并濾液，減壓濃縮干燥得褐色蕨菜黃酮提取物，即蕨菜黃酮”。然而，該提取方法時間長，耗能多，且蕨菜黃酮的提取率僅有7％左右，還尚待進一步改進。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種提取時間短、耗能少，且蕨菜黃酮提取率高的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：一種超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，包括如下步驟：

(1)采取新鮮的蕨菜幼嫩葉及葉柄殺青、烘干、粉碎，過篩后得蕨菜干粉；

(2)將蕨菜干粉放入三角燒瓶中，再按1:(15-20)比例加入濃度為70-75％乙醇，在超聲功率280-320W的條件下提取15-25min，提取2-4次，每次間隔14-16min；

(3)冷卻至室溫，向其加入1.3-1.8％復合酶，再于50-55℃溫度條件下浸提110-120min，過濾，收集濾液，得蕨菜黃酮提取液；

(4)減壓濃縮至漿狀，冷凍干燥，得粗蕨菜黃酮干粉；

(5)聚酰胺柱純化、冷凍干燥，得精制蕨菜黃酮干粉。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(1)中過篩為35-45目篩。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(3)中復合酶具體為含纖維素酶和果膠酶的復合酶。

作為本發明的優選方式之一，所述復合酶中纖維素酶和果膠酶的重量比為(1-3)：1。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(4)中蕨菜黃酮提取液于旋轉蒸發瓶中35-40℃溫度條件下進行減壓濃縮。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(5)中精制蕨菜黃酮干粉中含黃酮類物質大于60％，蕨菜黃酮提取率9.0-9.2％。