[發明專利]一種超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法

在審

• 申請號: 201711484171.6
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108096290A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 陳乃富;谷仿麗;姜雪萍;陳乃東;韓邦興;張自紅
• 申請（專利權）人: 皖西學院
• 主分類號: A61K36/12
• 分類號: A61K36/12;A61P19/06;A61P9/00;A61P13/12
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙) 34124
• 代理人: 王志興

1.一種超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)采取新鮮的蕨菜幼嫩葉及葉柄殺青、烘干、粉碎，過篩后得蕨菜干粉；

(2)將蕨菜干粉放入三角燒瓶中，再按1:(15-20)比例加入濃度為70-75％乙醇，在超聲功率280-320W的條件下提取15-25min，提取2-4次，每次間隔14-16min；

(3)冷卻至室溫，向其加入1.3-1.8％復合酶，再于50-55℃溫度條件下浸提110-120min，過濾，收集濾液，得蕨菜黃酮提取液；

(4)減壓濃縮至漿狀，冷凍干燥，得粗蕨菜黃酮干粉；

(5)聚酰胺柱純化、冷凍干燥，得精制蕨菜黃酮干粉。

2.根據權利要求1所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，所述步驟(1)中過篩為35-45目篩。

3.根據權利要求1所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，所述步驟(3)中復合酶具體為含纖維素酶和果膠酶的復合酶。

4.根據權利要求3所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，所述復合酶中纖維素酶和果膠酶的重量比為(1-3)：1。

5.根據權利要求1所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，所述步驟(4)中蕨菜黃酮提取液于旋轉蒸發瓶中35-40℃溫度條件下進行減壓濃縮。

6.根據權利要求1所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，所述步驟(5)中精制蕨菜黃酮干粉中含黃酮類物質大于60％，蕨菜黃酮提取率9.0-9.2％。

7.根據權利要求1所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，取步驟(5)中精制蕨菜黃酮干粉，加水稀釋溶解后，經石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取；將所得乙酸乙酯部分硅膠柱層析、乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，再經Sephadex LH20氯仿-甲醇及甲醇系統反復柱層析分離，甲醇反復重結晶，獲得蘆丁0.95-1.2％、紫云英苷0.80-0.90％。

8.根據權利要求7所述的超聲輔助復合酶法提取蕨菜中總黃酮的方法，其特征在于，所述精制蕨菜黃酮干粉加水稀釋溶解至1.1-1.3g/mL濃度后用于后期萃取。