[發(fā)明專利]皮膚細(xì)胞噴霧及其制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711484119.0
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN107899074A
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李小麗;陳昌盛;劉偉強
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳清華大學(xué)研究院
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/24;A61L27/38;A61L27/50;A61L27/60;A61L27/54
• 代理公司: 深圳市鼎言知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司44311
• 代理人: 曾昭毅,鄭海威

1.一種皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其包括如下步驟：

A.配置營養(yǎng)液，所述營養(yǎng)液為乳酸鹽溶液、細(xì)胞培養(yǎng)基混合溶液、生長因子中的兩種或幾種組合；

B.配置高分子懸液，所述高分子懸液中的高分子為透明質(zhì)酸鈉、膠原、明膠、硫酸軟骨素、海藻酸鈉、絲素蛋白、殼聚糖、多肽中的一種或幾種組合；

C.制備混合細(xì)胞懸液，選取真皮干細(xì)胞、表皮干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、祖細(xì)胞、毛囊干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、成纖維母細(xì)胞、T細(xì)胞、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞、羊水間充質(zhì)干細(xì)胞中的一種或者幾種組合，置于培養(yǎng)皿中，加入細(xì)胞特定的培養(yǎng)基，制得所述混合細(xì)胞懸液；

D.制備皮膚細(xì)胞噴霧制劑，將步驟A、B、C中所得的營養(yǎng)液、高分子懸液、混合細(xì)胞懸液中的一種或幾種混合形成制劑。

2.如權(quán)利要求1所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述生長因子由堿性成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、血小板衍生生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、肝細(xì)胞生長因子、胰島素生長因子中的一種或幾種構(gòu)成。

3.如權(quán)利要求1所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述配置高分子懸液包括：

用溶劑溶解所述高分子，所述溶劑為醋酸、丙二酸、水或所述營養(yǎng)液中的一種；

用氫氧化鈉，或鹽酸，或醋酸，或醋酸鈉調(diào)節(jié)溶液的pH值，直至溶液出現(xiàn)微小顆粒狀高分子聚集體或高分子微小纖維。

4.如權(quán)利要求3所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，通過用溶劑溶解所述高分子得到的殼聚糖溶液的濃度為0.5-20mg/mL，絲素蛋白溶液的濃度為0.1-10mg/mL，膠原蛋白溶液的濃度為0.1-10mg/mL，多肽溶液的濃度為0.1-20mg/mL，透明質(zhì)酸鈉溶液的濃度為0.1-30mg/mL，海藻酸鈉溶液的濃度為0.1-30mg/mL，硫酸軟骨素溶液的濃度為0.1-25mg/mL。

5.如權(quán)利要求4所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述殼聚糖溶液的pH值為4.0-6.5，分子量為1萬-30萬道爾頓；所述絲素蛋白溶液的pH值為5.2-7.4；所述膠原蛋白溶液的pH值6.5-7.8；所述多肽溶液的pH值為5.5-7.5，分子量為0.5-1萬道爾頓；所述透明質(zhì)酸鈉溶液的pH值為6.5-7.4，分子量為800-20000道爾頓；所述海藻酸鈉溶液的pH值為6.5-7.4，分子量為7.5萬-10萬道爾頓，D-古羅糖醛酸的含量大于60％；所述硫酸軟骨素溶液的pH為6.5-7.4，分子量為1000-50000道爾頓。

6.如權(quán)利要求3所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述氫氧化鈉的濃度為0.01-1mol/L，所述鹽酸的濃度為0.01-1mol/L，所述醋酸的濃度為0.01-0.5mol/L，所述醋酸鈉的濃度為0.01-0.5mol/L。

7.如權(quán)利要求3所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述高分子懸液中的高分子顆粒的大小為20-500微米。

8.如權(quán)利要求1所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述混合細(xì)胞懸液中的細(xì)胞是自體組織提取。

9.如權(quán)利要求1所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述混合細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)目為1×10⁵-2×10⁷個/mL，檢測細(xì)胞存活率為80％-100％。

10.如權(quán)利要求1所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法，其特征在于，所述營養(yǎng)液、高分子懸液、混合細(xì)胞懸液、皮膚細(xì)胞噴霧制劑的制備的條件均在無菌條件下進(jìn)行，材料選擇醫(yī)用級，溶液選擇注射級。

11.一種皮膚細(xì)胞噴霧，所述皮膚細(xì)胞噴霧由權(quán)利要求1-10中任意一項所述的皮膚細(xì)胞噴霧的制備方法制得。