[發明專利]一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法

在審

• 申請號: 201711483729.9
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108303476A
• 公開（公告）日: 2018-07-20
• 發明（設計）人: 王義;張鵬;金昌福;李寧飛
• 申請（專利權）人: 寧夏希望田野生物農業科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 賈澤純

1.一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于它是按照以下步驟進行的：

一、供試品樣品制備：

1)稱取含有林可霉素的菌渣，加入提取劑，渦旋振蕩1min，于超聲中輔助提取30min，以3000～4000rpm離心10min，取上清液；

2)稱取PSA、C₁₈和無水Na₂SO₄，渦旋混合1min后加入上一步的上清液，繼續渦旋1min，以4000rpm/min離心10min，收集上清液，得供試品溶液；

二、標準曲線繪制：

用甲醇將林可霉素標準貯備液稀釋成質量濃度為10.00mg/L、20.00mg/L、40.00mg/L、50mg/L、100.00mg/L、200.00mg/L和400mg/L標準工作溶液；采用高效液相色譜法對上述標準工作溶液進行檢測，以測得峰面積作為縱坐標，以標準工作溶液濃度作為橫坐標，繪制標準曲線，求回歸方程和相關系數；

三、測定：吸取上述標準品工作溶液和供試品溶液注入液相色譜儀中，根據外標法計算林可霉素素殘留量；

色譜條件：色譜柱：AglientExtend-C₁₈柱，色譜柱內徑為4.6mm，柱長250mm，填料顆粒直徑為5μm，流動相：甲醇-0.05moL/L四硼酸鈉十水合物按體積比為60:40混合的溶液，檢測波長：214nm，進樣量：10μL，流速：1mL/min，柱溫：30℃。

2.根據權利要求1所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于林可霉素菌渣與提取劑的質量體積比為1g：5～15mL。

3.根據權利要求1或2所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于林可霉素菌渣與提取劑的質量體積比為1g：10mL。

4.根據權利要求1所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于提取劑為體積百分含量為0.1％～0.15％的氨化乙腈。

5.根據權利要求1或4所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于提取劑為體積百分含量為0.12％的氨化乙腈。

6.根據權利要求1所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于PSA、C₁₈和無水Na₂SO₄的質量體積比為0.05～0.1g：1.0g：10mL。

7.根據權利要求1或6所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于PSA、C₁₈和無水Na₂SO₄的質量體積比為0.05g：1.0g：10mL。

8.根據權利要求1所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于步驟二中無水Na₂SO₄與加入的上清液體積比為10：4。

9.根據權利要求1所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于菌渣中林可霉素殘留量為800～850mg/Kg。

10.根據權利要求1或9所述的一種菌渣中林可霉素殘留量的檢測方法，其特征在于菌渣中林可霉素殘留量為800～820mg/Kg。